搜索到 671 条结果
综合
实验
方法
问答
文章
用于 PCR 的模板 DNA 制备实验
模板 DNA 质量直接影响 PCR 结果，是 PCR 成功的关键之一。根据其检测对象（组织细胞材料）的不同，有不同的制备方法，常用的材料有石蜡切片、冰冻切片、血细胞、胸腹水等。来源《免疫组织化学实验技术及应用》
实验概况收录 6 操作方法 · 3 相关文章
制备 DNA 测序模板实验
本实验包含了用于制备适用于双脱氧测序的模板及适用于末端标记和化学测序的DNA的实验方案。所有用于双脱氧测序的双链模板在与引物退火前必须变性，在一般应用上，碱变性在测序中的效果比热变性好。
实验概况收录 3 操作方法 · 3 相关文章
双链模板
1. 对于18 μg DNA溶液，加入10×NaOH/EDTA溶液至1×的浓度，在室温放置5 min。2. 加入1.5倍体积的1.5 mol/l pH4.5乙酸铵缓冲液中和。3. 加2.5倍体积乙醇-70℃沉淀15 min，离心，沉淀用70%乙醇洗涤后，在Speedvac蒸发器中干燥5 min。4. 重溶于55 μl 水中，替代M13模板步骤3中的单链模板进行其后的操作。
操作方法所属实验：mRNA 的 S1 作图实验
M13模板
单链模板DNA和9 μl 10×TM缓冲液加入已磷酸化的寡聚核苷酸中，40℃杂交15 min。 4. 加入9 μl 4 mmol/l dNTP混合液和2 μl klenow酶，37℃保温30 min 以延伸寡核苷酸模板，65℃加热5 min 灭活klenow酶后置于冰浴。5. 加入10 μl 10×限制酶缓冲液和40 U 限制性内切酶，37℃保温45 min 切割探针，65℃加热5 min 灭活限制酶。 6. 加入100 μl 5mol/l 乙酸铵和500 μl 乙醇，-20℃沉淀过夜或干冰
操作方法所属实验：mRNA 的 S1 作图实验
模板 template
［1］在核酸的合成反应中，根据碱基互补原则。给反应产物提供特定的碱基排列所必需的核酸称为模板。例如， RNA多聚酶可以双链 DNA中的一股为模板，合成与之在碱基排列上互补的 RNA。［ 2］在免疫理论中有一种模板学说，认为抗原是抗体形成细胞产生的抗体结合区的模板，也就是说在这种情况下，抗原就称为模板。
文章资讯824 阅读
测序模板的快速纯化
测序模板的快速纯化 【材料和试剂】 （1）真空泵 （2）PEG/NaCl溶液 （3）碘化物缓冲液 （4）70%乙醇 （5）TE缓冲液 10mM Tris-HCl，pH 8.0； 1mM EDTA 【操作步骤】 （1）扩增噬斑（见上述），在第一次离心后，将500ml含有噬菌体的上清转入新的离心管中。 （2）加入200ml PEG/NaCl，颠倒混匀，室温
文章资讯1819 阅读
模板 DNA 的准备、实验的组织和 PCR 扩增实验
可以用各种方法分离基因组 DNA, 主要决定于初始材料的种类（血液还是组织）和数量。所有制备的 DNA 都应该储存于 pH8.0 的 TE 缓冲液中并装在灭菌的 Eppendorf 管内。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
双脱氧链终止法测序用变性模板的制备实验
下面通过碱变性质粒 DNA 的方法应与方案 3 联合使用，因在此过程中采用测序酶催化双脱氧测序反应。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
模板 DNA 的准备、实验的组织和 PCR 扩增实验
一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂含 15 mmol/LMgCl2 的 10XPCR 缓冲液 (GeneAmpPCR 缓冲液 I，AppliedBiosystems)灭过菌的 ddH202. 酶和酶缓冲液TaqDNA 聚合酶，(AppliedBiosystems 或 Invitrogen)3. 核酸和寡核苷酸基因组 DNA10 mmol/L dNTP(GeneAmpPCRdNTP 混合物，AppliedBiosystems)寡核苷酸引物（Invitrogen 公司合成，稀释成 lOumol/L
操作方法所属实验：模板 DNA 的准备、实验的组织和 PCR 扩增实验
PCR 反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计，酶的质量。模板的制备，在前二者都稳定可行的情况下，PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基本技能，决定分离模板核酸(DNA或RNA)的质和量及PCR的成败。而提高模板核酸质量的 关键是除去杂质(蛋白质、酶、脂肪等)。除去抑制Taq DNA聚合酶活性抑制因子，提高模板核酸的产量。传统的核酸模板提取方法是采用去垢剂如SDS等来破坏细胞组份，溶解细胞膜，使蛋白质变性，再用蛋白酶K来消化去除蛋白质，尤其是与DNA结合的蛋白质，再用酚:氯
操作方法所属实验：PCR 技术
模板组装(template assembly)
由模板指导,在一系列酶的催化下,合成新的、与模板完全相同的分子。这是细胞内一种极其重要的组装方式, DNA和RNA的分子组装就属于此类。
文章资讯1127 阅读
PCR反应体系的模板
PCR 反应体系的模板 几乎所有形式的DNA和RNA都是PCR反应的合适底物，包括基因组DNA、质粒DNA、噬菌体DNA、预先扩增的DNA、cDNA和mRNA。大多数PCR操作中,对DNA模板的要求都不高,纯度要求亦不严,用量很低。理论上,单拷贝基因都可以扩增,但从高度复杂的DNA样品中进行扩增,可能比从质粒、噬菌体中进行扩增要困难些，如在PCR反应前用机械剪切或稀有限制酶消化基因组DNA可提高产量。 核酸标本来源广泛,可以从纯培养的细胞或微生物中
文章资讯10554 阅读
以双链 DNA 为模板的体外诱变：用 DpnⅠ选择突变体实验
本方案和方案 4 是以变性质粒 DNA 为模板，使用两条寡核苷酸和高保真聚合酶引导 DNA 合成。本方案中，经多轮热循环全长双链质粒 DNA 将以线性形式扩增，产生一种 DNA 双链上带交错缺口的突变质粒（Hemsleyetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。
实验概况收录 1 操作方法 · 3 相关文章
用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验
1. 准备如下的重组混合液：约 8 ug 未标记的超声破碎的牛胸腺 DNA （作为载体 DNA； 加自 1～2 mg/ml 储液）200 000～400 000 cpm 单独标记的 DNA6.4 ug （组蛋白：DNA 为 0.8：1） 或 0.8 ug（组蛋白：DNA 为 1：1） 纯化的天然核心组蛋白（H2A/H2B 和 H3/H4）160 ul 5 mol/L NaCl （终浓度 2.0 mol/L）TE 缓冲液，pH 8.0，至 400 ul。2. 室温 30 min。3. 将重组混合
操作方法所属实验：用逐步盐透析的方法组装核小体模板实验
以 cDNA 为模板的 PCR 实验流程
1、在 0.2 ml PCR 管中配制 25 μL 反应体系：2.5 mmol/L dNTP 混合物 2 μL，10 × PCR buffer 2.5 μL，正向引物（10 μmol/mL）1 μL，反向引物（10 μmol/mL）1 μL，cDNA 模板 10-100 ng（X μL），DNA 聚合酶 1 U（0.5 μL），高压灭菌 ddH2O 补齐至 25 μL。2、按以下程序在 PCR 仪内进行扩增：① 94 ℃ 预变性 5 min，② 94 ℃ 变性 1 min，③ 55 ℃ 退火
操作方法所属实验：菌落 PCR
没找到想要的答案，提个问题吧~专业科研天团 48 小时有问必答~去提问
关于丁香通
公司信息
个人用户
企业机构
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序