dxy_wmbygf19
有没有同学在养HUEVC呀!救命
我用multicell 90%DMEM+10%FBS培养,融合度达90%后,用0.25%胰蛋白酶室温消化5分钟,离心1000rpm5分钟,去掉上清,加入新培养基将细胞吹打成单细胞后(肉眼未见细胞团),转移至培养瓶,但是很快细胞就自动聚团了(半分钟之内发生,肉眼可见的细胞团块,斑片状)。
以下是悬浮状态下的镜下观,很多细胞团。
贴壁之后细胞也是一团一团的生长。
后面认为是消化强度不够又用0.25%胰酶+0.53mMETDA消化3分钟,依旧聚团。各位大佬都是怎么消化的呢?或者是我的培养体系不合适吗?
溺水行粥
消化1分左右,变圆,就终止,可以试试
dxy_wmbygf19
谢谢,已经解决了,买新细胞了😂
dxy_8reajdze
我也养这个,也是很容易聚团,后来师姐说可以涡旋,我后面就重悬后涡旋3到5秒钟,就分散得很好了