药物处理后细胞镜下观察明显死亡，但cck8检测与对照无差异

请问你找到原因了吗？我也遇到了同样的问题。细胞死了测出来活性很高，细胞活着测出来活性很低

我跟你情况差不多，我是肉眼观细胞没死那么多，但是测出来模型组只有对照组活力的30%。找不到原因。。

可能与配置细胞悬液和加入cck8溶液后醇的时间过长相关。

还有就是，96孔板里面染菌了，细胞形态有变化，但是测cck8的时候会把这些菌也当作活细胞测了

原因：一些物质会影响CCK-8的实验测定结果，当培养体系内含有还原性物质存在时会还原WST-8，从而使OD值增加；当有氧化性物质存在时会抑制还原反应进而使OD值减小。

如果药物是中药或复方提取物的话，还要考虑药物浓度过高导致药物沉积在孔底，也可能会导致OD值偏高。

解决办法：更换新的培养基后再加CCK8，甚至可以用PBS清洗一下细胞再用新的培养基加CCK8。

那就要看看具体CCk8哪里出现问题了，大多数还是cck8实验的问题，可以考虑重复实验，如果不行，建议减少一点细胞密度看看。

你是不是把死细胞洗走了，导致剩下的都是活细胞，因而检测结果不准确。

你铺的细胞太多，cck8已经无法分辨出差异 ，cck8只能检测活细胞

可以摸索一下细胞的种板量以及贴壁时间，看是否能够解决

CCK8检测要考虑的影响因素：

1.加入CCK8溶液时孔中生成气泡，会影响OD 值的读数；

2.要设计空白对照组；

3.对于大多数情况，加入CCK8溶液后，孵育2h左右就可以了；

4.使用酶标仪之前要提前开启10min预热；

5.若连续多天检测，必须保持所有条件一致。

CCK-8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量，如果细胞已经死亡，但脱氢酶的活性还在，则试剂测定的细胞数量将会比真实值高，不能真实反映活细胞数量

细胞太密会影响检测结果，另外检测波长有没有选对