迷糊的人间清醒
高山云初
细胞内的检测需要经过适当的处理,即制成约10%的匀浆液,放置-20℃冰箱内,反复冰融3次,然后用显微镜观察细胞是否完全破碎,如不完全则继续冻融2次,再以4000转/分,离心15分钟,匀浆上清液作SOD、MDA测定。而细胞上清则无须这些步骤,直接检测即可。细胞测MDA有以下建议,希望有帮助
1.细胞的量要大,用75 cm2的大瓶比较好。细胞量少了最后比色时值可能和空白一样。
2.-20度反复冻融三次和超声效果差不多,但用超声速度快一点。每次冻融时用漩涡振荡仪把它混匀;超声时要注意时间,不要过热。
3.尽量不要用南京建成的试剂盒,效果不理想。TBA法很成熟,我们都是自己配的,效果很好。
4.一定要做空白对照,最好做阳性对照。
5.煮沸时,在离心管上用针戳个洞,以免液体喷出。
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细胞实验MDA检测一般需要重复三次。
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丙二醛(MDA)是脂质过氧化物分解后形成的一种化合物。因此,MDA是检测细胞和组织中脂质过氧化物的最常见的指标之一,在氧化应激、铁死亡等领域的研究中被广泛使用。每组至少3个复孔,国内来说3次就可以做统计了,但是国外有些文献上有4-12次不等
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每组至少3个复孔,国内来说3次就可以做统计了,但是国外有些文献上有4-12次不等,供参考 分析总结