小鼠肺泡灌溪液用瑞氏吉姆萨染色液染一直染不好，染色时间都在试剂说明书基础上做了调整，但细胞胞核颜色总是偏深，有染的好的吗

考虑肺泡灌洗液重悬液的细胞浓度过大或有核细胞太过密集或PH偏碱导致。建议不改变浓度可以尝试推片制片，然后分别在低倍镜，高倍镜或者油镜下观察和分类细胞。

感觉你的细胞不是很多，适当减少染色浓度，和时间试试

染色时间须视涂片厚度，有核细胞多少，染血液涂片时滴加B液后染2-4分钟，气温较低时，可适当延长染色时间。染色结果如出现嗜酸性粒细胞变碱，则考虑是否染色时间太长所致。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。

对于小鼠肺泡灌溪液的瑞氏-吉姆萨染色,如果一直无法得到理想的染色效果,可能存在以下几个原因:

1. 染色时间过长或染色液浓度过高。这会导致胞核染色过深,影响染色效果。可以适当缩短染色时间或稀释染色液。

2. 染色温度过高。高温会加快染色反应速度,导致染色过深。应控制在室温条件下进行染色。

3. 样品制片质量问题。如果制片厚度不均,染色液渗透不均,会导致染色效果差且不一致。应检查制片方法和质量。

4. 染色操作不当。如A液染色结束后未及时用distilled water充分洗涤,直接B液染色会导致交叉污染,产生过深染色。应严格遵循正确的染色步骤。

5. 实验室环境因素。如光照过强也会促进染色反应,导致染色过深。应避免在强光照下进行染色操作。

6. 试剂质量问题。如果试剂超过有效期限或者未正确保存,也会影响染色质量。应检查试剂有效期和保存方法。

提高瑞氏-吉姆萨染色质量的方法:

1. 适当减少染色时间或稀释染色液,控制染色过程。

2. 严格控制染色温度,在室温下进行。

3. 检查并改进制片方法,提高制片质量。

4. 严格按照正确步骤进行染色操作,特别是A液染色后及时用水洗净。

5. 染色过程避免光照,或在遮光条件下进行。

6. 检查试剂有效期和保存方法,新试剂可能需要重新配制。

7. 综合运用上述多种方法,逐步优化染色条件,以获得理想的染色效果。

瑞氏-吉姆萨双重染色法是一项较为复杂的技术,往往需要对染色条件和步骤进行系统优化才能获得高质量的染色结果。