【求助】小鼠骨髓间充质干细胞培养，第一代就分化了，什么原因呢？

控制细胞密度避免过大、选用较好血清或无血清培养

以下是一些可能导致细胞分化和杂细胞增加的常见原因和相应的建议：

1. 细胞来源：细胞的来源和品系可能会对细胞的分化和杂质产生影响。确保选择合适的小鼠品系和适龄的小鼠，以获得较纯的骨髓间充质干细胞。

2. 细胞分离和纯化：在细胞分离和纯化过程中，细胞杂质的存在可能导致分化和杂细胞的增加。请确保在细胞分离过程中采用适当的方法和筛选条件，以获得较纯的MSCs。

3. 培养基配方：培养基中的成分和配方可能会对细胞的分化和杂细胞产生影响。考虑使用适当的培养基配方，如专门用于MSCs培养的DMEM/F12或α-MEM，添加适当的生长因子或补充物，以促进MSCs的增殖和维持干细胞状态。

4. 培养条件：培养条件，包括温度、湿度、氧气水平等，也可能对细胞的分化和杂细胞产生影响。确保提供适当的培养条件和细胞培养环境，例如适宜的温度（通常为37°C）、5% CO2气氛等。

关于图上呈现的整体偏圆的多角形细胞，这些细胞可能是分化的MSCs，或者其他细胞类型的存在。进一步的细胞表型分析和鉴定，例如免疫染色或分子分析，可能有助于确定细胞类型和了解分化情况。

细胞本身就容易被污染和老化，因此在提取的时候一定要注意无菌操作以及尽量减少杂物残留