thp-1细胞的传代问题

推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次 。 传代操作 当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml

THP-1细胞可以有两种传代方法。

1.如果镜下观察细胞状态很好，没有其它杂质即细胞裂解物之类的，就可以采用直接传代法。传代 前将细胞培养瓶直立一个半小时使细胞自然下沉。吸弃上层少量培养液约三分之一，将余下的培养液分成两瓶，再分别补加培养液即可。

2.如果镜下观察觉得培养液中 有杂质即可采用离心传代法。如果细胞数目较多可以低速离心约600转离心六分钟，细胞可以沉淀下来而且可以去除细胞碎片之类的杂质。如果觉得细胞数目不多 比较宝贵，那就提高转速可以1000转离心六分钟，这样细胞损失很少但可能也有些杂质会一起沉淀下来。离心后去除上清液，加入新的培养液吹打浑匀即可分瓶 传代了。

可以按照以下步骤进行：

1. 收获细胞：当THP-1细胞培养达到80-90%的密度时，可以进行传代。首先将细胞培养皿中的培养基倒掉，然后使用无菌PBS或细胞解离液轻轻冲洗细胞以去除细胞培养皿中的细胞残留物。

2. 细胞解离：添加适量的细胞解离液（如无酶型胰蛋白酶）至细胞培养皿中，并将其放置在37°C孵育箱中进行约5-10分钟的消化，以使细胞从底部解离。

3. 稀释细胞：使用完全培养基（如RPMI 1640培养基）或适当的培养基来中和细胞解离液中的酶活性。然后将细胞悬浮液转移至新的细胞培养皿中，添加足够的新鲜培养基，以使最终的细胞密度适合细胞培养的需求。

4. 培养细胞：将新的细胞培养皿放置在37°C的细胞培养箱中继续培养。建议每2-3天更换一次完全培养基，并监测细胞密度和健康状态。

5. 传代比例：传代比例通常是将细胞分成1:2至1:5的比例进行传代，具体取决于细胞的生长速率和需要的细胞密度。较小的传代比例可以用于保持细胞的增殖速率，而较大的传代比例则可用于增加细胞数量。

6. 传代时间：THP-1细胞的传代时间可以根据细胞生长速率和实验需求来确定。一般来说，每2-3天进行一次传代可以维持细胞的健康生长和稳定。

7. 培养瓶选择：THP-1细胞可在常规细胞培养瓶中进行培养，如25 cm²或75 cm²的培养瓶。选择培养瓶时，可根据所需的细胞数量和实验需求来确定。