293细胞的传代

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293细胞

人胚肾细胞系293是一种E1区缺陷互补细胞系。用磷酸钙共转染 法很容易使DNA进入细胞。悬浮的293细胞很容易大规模培养，但不容易长期保持稳定，应用时最好采用单层培养。

传达次数较少的单层培养293细胞是成功获得重组 病毒和病毒斑的关键。293细胞的培养质量特别是单层培养的品质情况是病毒斑形成的重要因素。也是重组子构建成功与否的关键。293细胞在传代120次以后，其生长状况不再完全是单层的了，偶尔会形成局部的细胞成团聚集，一旦出现这种情况很能形成病毒斑。应立即抛弃，重新引入新传代的细胞。单层培养细胞在5-10%FBSDMEM中能生长很好。一般来讲，1：10传代后，一周可以长满。严禁过度生长，这点很重要。因为会导致细胞密度加大和堆积，影响病毒斑的形成和转染