梅雨季节，怎么防止支原体污染？

以下是一些防止支原体污染的常用方法：

1. 严格的无菌操作：在实验室中进行严格的无菌操作，包括使用无菌技术和消毒实验台、操作器具和培养皿。确保培养物和培养液都不受外界环境的污染。

2. 经常更换培养基：定期更换培养基可以减少细菌和支原体的增殖。培养基中添加适量的抗生素，如青霉素和链霉素，可以预防细菌和支原体的污染。

3. 定期检测和筛查：使用特定的检测方法，如聚合酶链式反应（PCR）或荧光染色等，定期对培养物进行支原体检测和筛查。这可以帮助及早发现并采取措施处理污染问题。

4. 个人卫生和清洁：保持良好的个人卫生和实验室清洁，包括经常洗手、穿戴适当的实验服和手套，并及时清理和消毒工作区域。

5. 使用经过验证的细胞株：使用经过验证的细胞株，确保其不受支原体或其他细菌的污染。在引入新的细胞株或从他人处获得细胞时，进行支原体检测是非常重要的。

从以下几方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基冲加入适量的抗生素。

保持细胞间空气循环良好，规范操作就行

主要从以下几点预防：

（1）控制环境污染：可以使用支原体清除喷雾（Mycoplasma-Off）进行空间消毒；用新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室或用甲醛熏蒸法消毒无菌室；生物安全柜或超净工作台也要定期消毒；每次使用生物安全柜或超净工作台后要做好清洁工作，减少不必要的物品堆放在内部；在水浴锅中加入消毒试剂；在培养箱的水源中加入消毒试剂。

（2）严格操作要求：工作开始要先用75%酒精消毒手部以及袖口、瓶口等；在进行多种细胞培养操作时，所用器具（如移液枪等）要严格区分；在进行换液或传代操作时，注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口，以免把细菌带到培养液中污染其他细胞。细胞培养实验室应制定严格的管理制度，按照规范的实验程序操作。

（3）保证细胞培养基和器材无菌，器材一般都经过辐射处理，基本可以保证无菌，商业化CD培养基一般也能保证无菌。如实验室有发现支原体感染，已经开启的培养基不宜继续使用。

（4）在培养基中加入适量抗生素：对支原体比较有效的抗生素为四环素类和大环内酯类，如卡那霉素50μg/ml，一些氟喹诺酮也有抑制支原体生长的作用。也有专用的支原体清除剂可用来预防细胞被支原体污染。

（5）制备细胞的原始组织或器官污染：从来源可靠的原始组织或器官制备细胞。

（6）种子库污染：从可靠来源引进、使用细胞,特别是知名的信誉良好的专门机构,如ATCC、基础医学细胞中心等,这些机构对细胞质量进行一系列检测。细胞一旦购置或从别处引入，均应及早留种冻存，一旦发生污染可重新复苏培养。建立良好的种子库管理规章制度，并定期对实验室中的培养物进行支原体检测。