翼飞飞
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1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度;
2.分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物;
3.使用无菌酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ;
4.启用新的保种细胞 ;
5.调节最佳接种细胞浓度。
土井挞克树
可以尝试添加血清,因为血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。
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培养瓶或者培养皿的材质对细胞贴壁影响超级大,可以换个其他的培养皿试一试
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可能原因:
1.胰蛋白酶消化过度 ;
2.支原体污染 ;
3.培养基pH值过碱(NaHCO3分解);
4.细胞老化 ;
5.接种细胞起始浓度太低或太高 。
解决方法:
1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度;
2.分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物;
3.使用无菌酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ;
4.启用新的保种细胞 ;
5.调节最佳接种细胞浓度。
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这个没什么好办法,贴壁不牢的吹洗掉就可以了,然后留下来的就是贴壁牢固的。
要么就是多培养一段时间,不要频繁更换培养基试试。