细胞培养过程中出现黑胶虫污染怎么解决

细胞培养过程中出现黑胶虫污染是一种常见的问题，但可以采取一些措施来解决这个问题：

1. 隔离受污染的细胞：首先，将受污染的细胞与其他未受污染的细胞隔离开来，以防止进一步传播。

2. 清除污染源：检查培养皿、培养瓶、培养基和培养室等，找出可能引起污染的源头。对受污染的培养皿或瓶子进行处理或清洗。

3. 更换培养基：将细胞转移到新的培养基中，确保培养基不被污染源所影响。

4. 清洁培养设备：对培养皿、培养瓶、培养箱、传代工具等进行彻底的清洁和消毒。使用消毒剂（如70％乙醇）对设备表面进行消毒，避免交叉污染。

5. 检查细胞来源：确认细胞的来源是否可靠，并确保从可靠的来源获取新的、未受污染的细胞。

6. 密切监测：在处理黑胶虫污染后，细胞培养过程中要密切监测细胞状态。如果再次观察到污染迹象，需要采取进一步的措施。

如果是贴壁细胞黑胶虫污染的话，可用无菌的PBS洗几次，可一定程度上缓解。若是悬浮细胞黑胶虫污染的话，就不太好处理拉，可以向其中少加一点滋养细胞。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效！还有就是实验环境要注意好，保持细胞间整个环境的洁净度

黑胶虫污染很难挽救，黑胶虫究竟是何物还很难确定，只能防不能治。

01换好一点的血清，这样可以有效减少“小黑点”的形成。

一般的血清都不要去灭活处理，因为经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。

而经过热灭活的血清，沉淀物的形成会显著增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。除非是在做免疫学研究或培养干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，才推荐做热灭活。所以在不是做免疫学研究或培养干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞培养时，血清尽量不经热灭活。

02如果是贴壁细胞的话，可用无菌的PBS洗几次，可一定程度上缓解。若是悬浮的话，就不太好处理了，可以向其中少加一点滋养细胞。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效！还有就是实验环境要注意好，保持细胞间整个环境的洁净度。如果细胞不是非常珍贵，可以用伯氨奎、磺胺、四环素、贝尼尔，也有建议庆大霉素500ug/ml洗涤。

03换用好的一次性塑料培养瓶。

04停止复苏，停止养细胞，彻底消毒所有用于细胞培养的一切用品，包括所用的培养瓶，培养基，吸管，胰酶，孵箱，超净台、空间等等你能想到的和细胞培养相关的所有物品。一个星期后，再复苏污染之前冻存的细胞，注意你的白大衣衣袖污染即可。这样你可能觉得动作太大，但可以用一个星期的时间挽救两个月的时间，还有其他你为了找到污染源，去除污染所耗费的精力，和财力。

05在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打，冲洗干净后再加入培养液，坚持天天洗，传代时加生理盐水再离心一次，接种密度稍大一些，一段时间后，虫子就会大大减少，对细胞的生长也不会有大的影响。所有东西最好重配；如果实在要抢救，重点突破，留几瓶污染不是很严重的细胞抢救，其余弃去。

06。如果有其它可用的细胞，那么被污染的细胞最好扔掉；如没有，可试着用抗生素，最可靠的是细菌培养加药敏，根据药敏结果选择抗生素，当然不能影响到细胞的状态。