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提取的鱼原代肠上皮细胞,EDTA螯合法,没用酶,种在板子里就会很快漂浮聚集,密度越大越明显。这个问题已经卡住我2个月了,烦请各位前辈指点迷津。实验室没有师兄师姐做过,迷茫。找了很多论文论坛没看到突破点。
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排查板子材质,有的牌子的板子养细胞细胞就是容易漂浮
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可能原因:1.培养液中含钙、镁离子 2.支原体污染 3.蛋白酶过度消化使得细胞裂解释 4.DNA污染。
土井挞克树
考虑是细胞损伤了,可能是原代细胞状态不好,可能是受到污染导致的
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提取的鱼原代肠上皮细胞在种在培养板上后迅速漂浮和聚集的情况可能是由于多种因素导致的,以下是可能的解释和建议:
1. 细胞纯度问题:首先,请确保您提取的细胞是鱼原代肠上皮细胞,并且没有其他类型的细胞或杂质混合在其中。如果细胞纯度不高,可能会导致细胞漂浮和聚集。
2. 细胞准备和种植条件:注意细胞的密度和培养基的配方和温度。确保培养基的成分正确,pH值适宜,并且温度适合细胞生长。过高或过低的温度可能导致细胞异常行为。
3. 细胞外基质和附着因子:鱼肠上皮细胞可能对培养基中的细胞外基质和附着因子敏感。尝试使用不同类型的涂层(如胶原蛋白、明胶等)或添加细胞外基质成分(如胶原蛋白、纤维蛋白等)来增强细胞附着和生长。
4. 细胞应激和损伤:细胞的应激和损伤可能导致细胞异常行为,例如漂浮和聚集。确保在提取和种植过程中使用温和的条件,避免过度机械或化学应激。
5. 细胞的特殊性:不同种类的细胞具有不同的特性和行为。鱼原代肠上皮细胞可能具有特殊的生长和附着要求。建议参考相关的研究文献或专家的建议,了解鱼肠上皮细胞的特殊培养要求和技巧。