请问怎么计算混合菌落的数量呢？

1、菌落总数的计算方法 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。

2、 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d 式中： N —样品中菌落数 ΣC —平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和 n1 —第一稀释度（低稀释倍数）平板个数 n2 —第二稀释度（高稀释倍数）平板个数 d —稀释因子（第一稀释度） 示例： 稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度） 菌落数（CFU） 232，244 33，35 上述数据按8.2.2数字修约后，表示为25000或2.5×104。

3、 若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。

4、 若所有稀释度的平板菌落数均小于30 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

5、 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1 乘以最低稀释倍数计算。

6、 若所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU～300 CFU 之间，其中一部分小于30 CFU 或大于300 CFU 时，则以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。

7、 ps 8.2.2大于或等于100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0 代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。

比较常用的是菌落总数的测定。一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。

可以利用image图像覆盖混合菌落，或者使用菌落计数器进行混合菌落数量的计算

间接计数法（活菌计数法）

计算公式：每克样品中的菌株数=C/undefinedM其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。

对于混合的活菌计数，一种简便的方法是使用浓度计数室（例如海伦斯计数室）结合显微镜进行细胞计数。下面是一个基本的步骤：

1. 提取接种物：从壤中提取接种物，可以通过采样后将壤样悬浮在适当的缓冲液中，如生理盐水或磷酸盐缓冲液。确保样品均匀悬浮。

2. 稀释样品：接种物中可能含有大量的细菌和真菌，需要将样品适当稀释以便于计数。根据预估的细胞浓度，选择适当的稀释倍数。

3. 准备计数室：将浓度计数室放在显微镜上，并根据计数室的规格和划线选择适当的体积。

4. 装载样品：使用移液器将稀释后的样品取出一定体积（通常为10微升），轻轻放入计数室的计数格中。确保样品充分填满计数格，但不要溢出。

5. 显微观察：将计数室放在显微镜上，使用适当的放大倍数观察计数格中的细胞。对于活菌，可以通过其形态、运动性或染色特征进行鉴定。

6. 计数：使用显微镜对计数格中的细胞进行计数。通常，计数规则是在每个计数格的四个角和中央方格内计数细胞。根据所选的倍数和计数格的数量，计算出每毫升（或每升）的细胞数。

7. 数据分析：根据计数结果和稀释倍数，计算出初始样品的细胞浓度。如果需要考虑样品的稀释和计数室中的计数格数量，还可以进行修正。

菌落总数的计算方法 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。

若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算： N=∑C/（n1+0.1n2）d 式中： N —样品中菌落数 ΣC —平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和 n1 —第一稀释度（低稀释倍数）平板个数 n2 —第二稀释度（高稀释倍数）平板个数 d —稀释因子（第一稀释度） 示例： 稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度） 菌落数（CFU） 232，244 33，35 上述数据按8.2.2数字修约后，表示为25000或2.5×104。