求助，为什么这个细胞的周期拟合出来很奇怪

染色时间过长可能会影响细胞染色的效果，尤其是染色剂的扩散和细胞内染色效率的降低。建议您在流式细胞仪实验中，尽量严格控制各个步骤的时间，避免染色时间过长。一般来说，PI染色的时间可以控制在15-30分钟之间，根据细胞类型和实验要求适当调整。

另外，第二个出现的异常情况可能也与其状态有关。不同的细胞株、细胞类型和生长条件下的细胞状态可能不同，这可能会对细胞周期和染色结果产生影响。建议您在进行流式细胞仪实验前，先对细胞进行质量控制和鉴定，例如观察细胞形态、检测细胞的生长曲线和细胞周期等。同时，也要严格控制细胞的培养条件，避免不必要的影响。

考虑是染色过长，部分细胞死亡了，所以拟合出来有两个峰