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原因:
传代时细胞吹打不均匀,没有将细胞团吹散;吹打太用力造成细胞死亡,细胞死亡释放的DNA与其他细胞形成黏性的细胞团;细胞离心速度多大或者离心时间过长;细胞长的太满才进行传代操作。
正确做法:
消化前加入适量缓冲液对细胞进行清洗,清除死亡的细胞团和部分堆叠杂质;消化后吹打时上下左右吹打约10次左右,注意控制力度;
确定细胞正确的离心条件,严格按条件执行;
细胞汇合度在80%~90%即可传代。
汤姆卜丽波
首先就是消化后离心之后吹细胞多吹几下,然后传代尽量分匀称,分好之后八字形铺匀
土井挞克树
可以使用pbs进行吹打,然后降低细胞密度,增加培养血清。
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铺细胞时候多摇一会,要铺均匀。