Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验-求助

4-5天刺激后可移去 beads ，上下移动细胞5-10次，避免有气泡和湍流，这个可以使细胞和 beads 分离。收集细胞到1.5ml管内，放到磁体上1min至 beads 到管壁上。把细胞移到另外的管内。分离 beads 前后各计数一次。

T细胞需要beads活化的，活化36h左右就行，严格来说，共培养前最好计数，这样可以比较每次实验差异的原因

T细胞共培前需要用beads活化时间2天。

1.对于T细胞的共培养，一般需要用Beads（例如CD3/CD28 beads）来活化T细胞。活化时间一般为24-48小时，根据具体实验目的和试剂厂家建议来确定。在进行共培养前，需要计数细胞数以确保实验的可重复性和可比性。

2.目标细胞使用2000-5000个进行共培养一般是没有问题的，但是具体的细胞数应该根据实验目的和细胞类型来确定。

3.自发释放组的荧光值超高可能与实验条件有关，例如细胞密度、温度、培养时间等。如果细胞状态没有问题，建议检查其他实验条件是否有误，例如染色体丝粒的形成是否受到影响、显微镜成像是否正确等。同时也需要检查实验操作的准确性，例如抽液等步骤是否正确。如果实验条件和实验操作没有问题，可以考虑进行重复实验以验证实验结果。