CAR-T细胞总是聚团生长

一般可以从以下几个方面分析：

1、消化的过程可能过于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太强或有毒性等会导致细胞死亡。细胞死亡后会释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团。

2、细胞离心速度过大或时间太长，也容易造成细胞抱团。

3、消化不完全的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难。

4、悬浮细胞培养摇瓶、状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差）。

5、传代时没有吹打均匀，细胞团多，培养时就会是一团一团的。

6、接种不均匀，或者是细胞未消化开。

7、非震荡培养或细菌（胞）量过多的话就会成团。

主要原因可能还是细胞质量问题，本身代谢就慢或者脆弱；再一个可能跟培养过程中的维护有关系，细胞密度太低或者太高都会导致细胞凋亡，死亡的细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物，这些絮状物在显微镜下看的话就是细胞聚集。

CAR-T细胞在培养中聚集可能有多种原因，以下列举几个可能的原因：

细胞浓度过高：如果细胞密度过高，细胞就会开始聚集在一起。在培养细胞时，需要控制细胞密度，以避免过高的细胞密度导致细胞聚集。

细胞在繁殖时分泌黏附分子：细胞在繁殖时可能分泌一些黏附分子，这些分子可以使细胞聚集在一起。一些研究表明，CAR-T细胞也会分泌黏附分子，从而导致细胞聚集。

培养基成分：培养基中的某些成分可能会促进细胞聚集。例如，一些培养基中含有聚丙烯酰胺等聚合物，这些聚合物可以促进细胞聚集。使用不含聚合物的培养基可能会减少细胞聚集。

如果想要减少CAR-T细胞的聚集，可以尝试以下方法：

控制细胞密度：在培养细胞时，控制细胞密度，避免细胞密度过高。

改变培养基成分：尝试使用不含聚合物的培养基，或者减少聚合物的含量。

均匀摇动：将细胞培养器放在均匀摇动的培养箱中，可以减少细胞聚集。

改变培养器：尝试使用不同类型的培养器，例如滚筒式培养器，可以减少细胞聚集。