【求助】annexin V /PI双染法测试肿瘤细胞凋亡

消化之前也要收集培养基中的细胞。

有几个可能导致细胞凋亡检测结果异常的因素：

使用含有EDTA的胰酶消化细胞。EDTA可以螯合金属离子，包括钙离子，而钙离子是细胞凋亡过程中的关键调节因子。如果细胞被EDTA螯合，可能会影响细胞凋亡的发生和检测。

细胞洗涤的过程中，离心时间和速度是否一致。离心时间和速度不一致可能导致部分细胞沉淀不下来，从而影响染色结果。

细胞浓度是否过高。如果细胞浓度过高，细胞间的相互作用可能会影响细胞凋亡的发生和检测。

Annexin V/PI染色方法的特异性和灵敏度。染色试剂的质量可能会影响染色效果，建议使用经过验证的试剂盒。

为了解决这些问题，您可以尝试以下措施：

使用不含EDTA的胰酶消化细胞。

在洗涤过程中保持离心时间和速度一致，以确保所有细胞都可以沉淀下来。

调整细胞浓度，以确保细胞间的相互作用不会影响染色结果。

确保使用的染色试剂是经过验证的高质量试剂。

药物浓度不够，所以没有筛选出来，应该提升药物浓度

可以用cck8再摸索一下药物梯度，另外正式实验时也需要阳性对照和阴性对照