免疫磁珠分选与其他分选技术（如流式细胞术）相比有何优缺点？

流式分选一般都是电荷式分选，即对感兴趣的目标细胞所在的液滴充上电荷，液滴经过电极板，通过电场作用发生偏转，从而实现分选。

磁珠分选首先使用磁珠偶联的抗体去标记细胞，然后把标记好的细胞过柱子，带磁珠的细胞就留在柱子上，不带磁珠的细胞就流走了，从而实现分选。

不同点：

1、对细胞的刺激。 磁珠分选最大的优势就是对细胞的刺激要小一点。因为流式分选细胞首先要经过几十微米的喷嘴，然后要被充电，还要经过几千伏的电场，最后以几十米每秒的速度落到收集管里面，有些原代细胞就受不了，分选免疫细胞也要考虑细胞活化的影响；而磁珠分选相对来说就对细胞没什么刺激。

2、设备要求。 磁珠分选小的实验室就能做，买一些专用的磁铁和柱子就可以了，而流式分选就需要分选型的流式细胞仪，都是几百万以上的。对操作员的要求来说，流式分选也要高一点，需要专门培训，需要注意的细节也要多很多。

3、试剂不同。 流式分选用的是荧光素偶联的抗体，磁珠分选用的是磁珠结合的抗体。

流式分选的优势：

4、分选纯度，流式分选的纯度高，磁珠分选如果操作好的话也能达到80-90%的纯度，但流式分选一般都能达到90％以上（样本制备和仪器条件正常的条件下）。

5、多参数分选。流式细胞术很大的优势就是多参数，分选CD4+CD25+CD127low的Treg，三色的一次就能分选。磁珠分选就必须先分CD4，再分CD25，更多参数的没法进行。

6、低表达群细胞分选。比如有些干细胞它的表达比例只有百分之零点几，比例太少磁珠分选无法操作，流式就可以把这些细胞富集起来。

7、胞内荧光分选。流式分选在分子生物学中很大一部分应用就是分选GFP、YFP等阳性细胞，还有可以用Hoechst染精子的单倍体进行分选，这些针对胞内成分的分选也是磁珠分选无法实现的。

现在习惯用磁珠分选和流式分选相结合的方法，如分选CD4+CD25+CD127low的Treg，如果仅用流式分选可能时间太长，纯度也有影响。那么可以选择先用磁珠纯化出CD4阳性的细胞，再过流式分选CD4+CD25+CD127low的群体，这样既节省了时间保证了活性，也可以提高分选的纯度。

有磁珠的特异性抗体结合的特性，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性抗体结合不具磁性，从而不在磁场中停留达到细胞分离的目的。

磁珠细胞分选所需设备简单，对技术人员要求不高，分选所得细胞灵敏度高、纯度好且细胞活性和复苏率较好，对于下游应用影响较小，应用前景较广。

磁珠法核酸提取试剂的优点:

  磁珠法是生物技术和纳米科技结合而成的新型技术，它有着其他DNA提取方法无法相比较的，具体优势有以下几点。

  1、利用磁珠法核酸提取试剂，核酸提取工作能够实现自动化、高通量操作，配合不同规格的自动核酸提取仪，就能够在短时间内提取到大量的核酸，大大提高了核酸提取的效率。满足了目前对于核酸提取高通量的要求，在疫情爆发时能够快速的进行原因筛查，这点是其他核酸提取方法无法赶超的。

  2、磁珠法核酸提取试剂操作简单，耗时较短，整个提取流程分为裂解、结合、洗涤、洗脱四步，在比较短的时间内即可完成。

  3、试剂中并没有苯、氯仿等对人体有害的试剂，对于实验操作人员的伤害更小，也保护了操作人员的身体健康。

  4、磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。

  5、灵敏度高，适合法医样本等痕量DNA提取。

磁珠法核酸提取试剂存在2个缺点。一个是技术发展较为滞后，现在采用的DNA提取技术仍然停留chelex—100法，其次是价格相对比较高，但是通过厂家不断的升级优化，已经将核酸提取成本降低了很多。

磁珠分选最大的优势就是对细胞的刺激要小一点。因为流式分选细胞首先要经过几十微米的喷嘴，然后要被充电，还要经过几千伏的电场，最后以几十米每秒的速度落到收集管里面，有些原代细胞就受不了，分选免疫细胞也要考虑细胞活化的影响；而磁珠分选相对来说就对细胞没什么刺激。

设备要求。 磁珠分选小的实验室就能做，买一些专用的磁铁和柱子就可以了，而流式分选就需要分选型的流式细胞仪，都是几百万以上的。对操作员的要求来说，流式分选也要高一点，需要专门培训，需要注意的细节也要多很多。分选纯度。这个肯定是流式分选的纯度高，磁珠分选如果操作好的话也能达到80-90%的纯度，但流式分选一般都能达到90％以上（样本制备和仪器条件正常的条件下）。

多参数分选。流式细胞术很大的优势就是多参数，比如我可以分选CD4+CD25+CD127low的Treg，三色的一次就能分选。磁珠分选就必须先分CD4，再分CD25，更多参数的就没法进行。

低表达群细胞分选。比如有些干细胞它的表达比例只有百分之零点几，比例太少磁珠分选无法操作，流式就可以把这些细胞富集起来。