wsndy111
Trizol 法提取 RNA 求助
求问各位师兄师姐,最近提 RNA ,加入氯仿离心后白膜总是糊在 ep 管上干扰吸取上清,等我吸完前面管子的上清后,糊在后面管子的白膜就掉下去了,有师兄师姐遇到过这种白膜糊在管子的情况吗?求问这种情况怎么处理?能等它静置一会儿再吸取上清吗?
毛利小五郎的徒弟
静止后再提取,考虑还是有析出。少量析出不影响
loveliufudan
遇到这种情况可以采取以下步骤:
将离心管静置5-10分钟,让糊在管子上的白膜沉淀到底部,然后再轻轻地吸取上清。
在加入氯仿之前,可以先将样品离心去除细胞碎片等杂质,这样可以减少白膜的产生。
在加入氯仿之前,可以加入少量的高盐缓冲液(如70%乙醇),轻轻混匀,然后离心,这样可以使白膜更容易形成并沉淀。
如果上清中仍然有残留的白膜,可以再次使用氯仿等方法进行提取,或者使用其他方法如热酚/氯仿法提取RNA。
huarenqiang5
加入氯仿后可以剧烈振荡 15~30s,静置 2~3min。
balalaLy
会有的,吸上清的时候小心一点,避开就行。吸到一点也影响不大
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