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贴壁细胞如何驯化成悬浮细胞?

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冰冰冰冰冰V

做了两次驯化实验最终都失败。293T细胞不至于吧。请问哪位老师能说说如何成功驯化

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5 个回答

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loveliufudan

有帮助

贴壁细胞驯化成悬浮细胞的方法有很多种,具体的实验步骤和条件可能因细胞类型而异。常见的方法包括液体培养、酶分离、离心等。

在液体培养中,通常需要将贴壁细胞移植到培养皿中,并在适当的时间内进行培养。在这种方法中,细胞会自动从培养皿表面脱离,形成悬浮细胞。

酶分离法则是通过使用特定的酶将细胞膜切割来实现驯化。离心法通过在高速下离心来将贴壁细胞离开培养皿表面。

如果你已经尝试了这些方法并且仍然无法成功驯化,建议检查实验条件是否正确,如细胞培养基类型、温度、湿度、培养时间等,或者可能需要尝试其他方法。

293T细胞是一种高效的细胞表达系统,通常不会有驯化问题,但是最终是否成功驯化还要看实验条件。

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huarenqiang5

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驯化细胞最需要的是耐心。同时使用专为悬浮培养细胞而改良的培养液是关键。可先从250m1至1000m1的转瓶开始驯化,或玻璃瓶加磁力搅拌子(50-100转),培养液加半满。改良的专用于悬浮细胞培养液,通常减掉钙离子、镁离子,避免细胞聚集成团。还需添加抑制泡沫形成剂。玻璃瓶需先进行硅化,防止细胞粘到玻璃壁上。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

早期贴壁准备的时候可以适当增加细胞密度

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此用户已注销

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保持120h活细胞密度增加不小于5倍,且活率高于95%,即可完成驯化,再经过至少5代摇瓶传代驯化培养后,即得到全悬浮细胞系。

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dxyc42u

有帮助

驯化细胞最需要的是耐心,同时使用专为悬浮培养细胞而改良的培养液是关键。

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