Culacc
请问各位朋友 TGF- beta1为什么刺激不起来原代大鼠乳鼠心肌成纤维细胞啊? 我换了两三家公司了应该不是公司的问题,人和大鼠种属都试过 也改变了浓度(10-20-50ng/ml) 也饥饿了(换成2%血清培养基饥饿24h) 也延长了时间 24h 48h 72h 帮帮孩子吧 孩子弄这个好多次了(之前有咨询过别的师姐说可能是细胞的问题 原代容易自己活化)非常感谢!
Dr_劉医生
原代细胞可能是原因之一, 建议选择培养好的传代2-3代的心肌成纤维细胞进行TGF-β1干预,多试试几个浓度:0、1、5、10ng/ml。
loveliufudan
TGF-beta1是细胞增殖和分化的重要调节因子,可以诱导心肌细胞转化为纤维细胞。如果TGF-beta1不能刺激原代大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,可能是多种原因导致的。
1.TGF-beta1蛋白质的质量问题:TGF-beta1蛋白质可能在储存和运输过程中受损,导致活性下降。
2.细胞的问题:细胞质量可能不佳,导致活性不高。
3.实验条件问题:TGF-beta1的浓度、时间、温度、饥饿等条件可能不合适。
4.活性失效问题:TGF-beta1活性可能被心肌细胞中的其他因子抑制。
5.细胞培养问题:细胞培养条件可能不合适,导致细胞状态不佳。
我建议您可以尝试使用其它细胞系或细胞来源来重复实验,或者更换其它活性检测方法,来证明TGF-beta1的活性。
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