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求助,细胞培养为何换液后区域性死亡?

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dxy_gtd78833

我养的是原代PBMC和THP1诱导的巨噬细胞,在换液后20min出现以下情况,换液后一天大片死亡,与正常细胞有明显分界,想请问这种情况是换液中培养液干掉了吗

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6 个回答

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先先贝医生

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请问楼主问题解决了吗?我最近也出现这样的情况!跪求楼主的解决方案!无比感谢!

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此用户已注销

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原先培养液的因素或者换液后细胞适应不了。

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dxy_gtd78833user-title

我之后尝试了相同培养基又不出现了,而且上次出现这样的情况是在一个孔里出现区域性死亡,剩下的细胞生长很好。。。不过我后面改进方法后又没有出现了

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huarenqiang5

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这种情况可能的原因包括:


1.由于更换了不同培养液或血清,细胞需要重新适应。


2.试剂保存不当,培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏。


3.培养物中有少量细菌或真菌污染。


4.接种细胞起始浓度太低。


5.细胞已老化。


6.支原体污染。

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土井挞克树

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可能存在微生物感染,建议消毒杀菌

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dxy_gtd78833user-title

我想想问问老师微生物污染可能加入后20分钟细胞就死了吗,因为我的细胞就是一下子就死了,而且只死了一个孔的一半

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bamboopiggy

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你换液的时候,干了多久?一般换液的时候,皿是盖着的,很难干到把细胞弄死的程度啊,会不会是你的培养皿有问题?

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dxy_gtd78833user-title

大概两三分钟吧,事实上我后面又尝试了吸的很干放了一段时间后又没有出现这种情况了

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balalaLy

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可能弃掉培养基后细胞干了,时间有点久,而且超净台或者生物安全柜的风比较大

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dxy_gtd78833user-title

事实上我后面尝试过全部吸掉放了一会儿并没有再出现这种情况,我也不太明白了

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