AlanNeko
细胞缺氧处理后测目标蛋白,免疫荧光显示缺氧组和对照组差异显著。但是WB结果缺氧组对照组目标蛋白相对含量几乎没有区别。请问各位老师前辈这可能是什么原因?
huarenqiang5
1、选择表达量高的细胞作为阳性对照,用于确定检测样本是否为阴性。
2、提高上样量,裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。
申东熙老伯
多重复几次,一次结果无差异说明不了什么,也可以再做做定量PCR看看。
小小小小小芳
一是目的蛋白表达量过低,无法达到 WB 检测下限;二是在样品制备过程中,目的蛋白发生了丢失。总的来说,就是蛋白样品出了问题!
毛利小五郎的徒弟
大概率是抗体的问题,wb和免疫荧光抗体一般不通用。
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