【求助】可以使目标蛋白不表达的方法

我现在在做有E-cadherin的课题，其中要涉及使E-cadherin不表达，请问除了RNAi，还有其他方法吗？谢谢

教材上没有。本人总结的文献上的方法有：

1、构建突变体 ，单点或者多点突变，使之缺失；
2、使用特异性抑制剂；
3、使用该蛋白的特异性单抗或者多抗，封闭该蛋白的作用；
4、使用与该蛋白性质相近的分子，使之与该蛋白竞争性发挥作用；
...

lz肯定是在动物或者细胞水平，除了干扰和抑制剂那就是用敲除了，要求高的话抑制剂可能还不行，个人认为应该是敲除>干扰>抑制剂。

路过，肤浅地讲两句：
第一　E-cadherin不表达的问题　它的在维持细胞结构稳定及其抑癌基因的作用是至关重要的，使其不表达，不知是否你的模型能构建成功；
第二　抑制剂一般来讲是抑制其功能，针对酶的抑制剂比较多，非酶的分子相对很少。E-cadherin的抑制剂似乎没听说，如果要在合成方面抑制的话，可能特异性很难做到；
第三　E-cadherin不表达最好是敲除，干扰与抑制的关系我认为抑制剂的作用应该会更强些
楼上讲“构建突变体 ，单点或者多点突变，使之缺失”我认为不正确－－突变体只是使其没功能，而非不表达。

最近做这个有点感触，虽然有些空泛，但是希望有用：
敲除和抑制
敲除：真正的完全不表达常规的方法比较难，一般都是构建gene targeting载体，得到小鼠模型后取其细胞做实验，这种方法一般都是完全的缺乏内源性基因的表达，目前也可以在人细胞株（HCT116）或者大鼠上做。这种方法对于一些对于细胞存活至关重要的基因有些问题，常常出现小鼠的胚胎死亡或者敲除细胞株的逐渐死亡。因此有条件性敲除（Cre小鼠）和杂合缺失等替代方法。具体方法要说的太多，你也可以查阅一下资料。
敲除后得到稳定表型的动物或者细胞，可以从整体水平观察该基因缺失后对机体各个系统功能的变化，更为全面，有可能发现更多的现象。但是这些细胞或个体从某种意义上来说属于“带病生存”，对于缺失的基因往往会出现一些代偿通路，因此研究的时候需要小心。
抑制：抑制一般来说分为转录水平抑制和转录后抑制。转录水平抑制一般方法目前还是RNAi，也就是说从基因表达上降低某种基因的水平，属于敲低（knockdown）。转录后抑制，一般是蛋白水平抑制，当然也有修饰水平的抑制，如磷酸化、去磷酸化等。常用的策略有抑制剂、特异性抗体或者封闭某些反应表位的多肽或者分子。
突变体竞争也是属于一种抑制策略，尽管不能从表达上减少内源性基因水平，但是可以利用外源性突变蛋白减低内源性蛋白的作用。
抑制一般属于短期行为，因此常常无法建立起良好的代偿旁路，而且投入相对较少，对前期研究，特别是体外细胞效应的观察更为实际。

值得提出的是，gene targeting除了敲除（Knockout，KO）之外还有Knockin，就是使该基因以突变体的形式表达，这种策略较KO稍复杂，但是有时候可以克服KO的一些缺点，更为准确。除了gene targeting之外，还有transgenic的策略，可以使RNAi在小鼠体内稳定表达或可诱导的表达，目前也是比较常用的knockdown策略。

各位老师好，请问我已知道一个基因的序列，但想知道它到底受哪些上游基因的调控，请问有什么方法能解决这个问题嘛？请老师们帮帮忙，我是个菜鸟。

求教Keap1/Nrf2-ARE信号通路的抑制剂。