求助：用ELISA检测细胞饥饿不同时间点酪蛋白的增加量怎么计算？增量如何变化？

T清风自来

2022-07-12

请问使用酶联免疫酪蛋白试剂盒测定细胞上清中不同时间点的酪蛋白浓度，预期在细胞进行饥饿过程中，随着饥饿时间的延长酪蛋白的增加量会逐渐降低直至增加不明显，但是ELISA检测后酪蛋白浓度结果有下降趋势，增量为负值，看不出预期效果。若取不同饥饿时间点，那么细胞酪蛋白合成的增量是指后一个时间点与前一个时间点的对比，还是与空白组的对比？没有出现预期结果与我的取样操作有关吗？

（取样：细胞上清，在不同饥饿时间点吸取细胞培养上清，2000r/min离心20min，转移至EP管中-20℃保存，备检。）

1 个回答

Eason老歌迷

2022-07-12

有帮助

elisa检测最重要的是就是数据处理了。1. ELISA的样本通常要设置1~2个复孔进行检测，分别求出标准品、实验组样本的吸光度的平均值。单个样本的检测值不应超出平均值的20%。2. 样本的OD（吸光度）平均值要减去标准品浓度为0时的OD平均值。3. 建立标准曲线:在对数坐标图上拟合四参数的逻辑函数曲线（X轴上为标准品浓度，Y轴为对应的OD值）。推荐使用origin软件。