dxy_csamswa8
星形孢菌素诱导293T细胞凋亡后,用caspase3/p17p19能检测到,用cleaved caspase 3检测不出来,原因是什么?
秋秋欣欣
cleaved caspase3的条带比较小,用高浓度的分离胶跑一下,加大一点蛋白量,看看
汤姆卜丽波
转膜时间不要太长,选择0.22um的膜用来转膜,需要注意蛋白是否转过等,可以通过marker预染,保证滤纸上不要有蛋白。如果你的是湿转的话,100v转的话时间可以低点,1h到1.5h看看。一抗4度过夜就行了不要孵育太久,不然背景会加深的。看看说明书的抗体推荐稀释度。
bamboopiggy
你还是用专门的凋亡试剂盒检测吧,wb,可能因为种种原因,你可能做不出来。
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