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raw264.7细胞形态是否正常,用来做动脉粥样硬化的模型

相关实验:细胞传代实验

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元月NNA

不是很贴壁,有一瞬间还以为是死了,今天传代1:3传的,是因为细胞太密了吗

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4 个回答

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荒诞小说

有帮助

看细胞形态还可以,圆圆的也没怎么分化,就是有点聚团生长。建议传代时轻柔吹打聚团细胞至单细胞和减少传代比例。

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bamboopiggy

有帮助

看细胞的状态不好,你要不传几代再做,这个细胞一般在融合率90%的时候,传代。

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汤姆卜丽波

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这个细胞传代一般用细胞刮或者吹打下来,RAW 264.7脱落后倾向于抱团,抱团时细胞是活着的,但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞,不然细胞很难重新贴壁,把细胞离心收集,用新鲜的培养基重悬细胞放到新的细胞培养瓶里之后,可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。这种情况下,把细胞离心收集,用1 mL培养基重悬,慢慢地,轻轻地吹打,直到细胞被吹成单细胞,就可以重新铺板了。

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天一湖医者

有帮助

不贴壁的可能原因:

●胰蛋白酶消化过度

●支原体污染

●培养基pH值过碱(NaHCO3分解)

●细胞老化

●接种细胞起始浓度太低或太高

解决方法:

●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度

●分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。

●使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2

●启用新的保种细胞

●调节最佳接种细胞浓度

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