荒诞小说
看细胞形态还可以,圆圆的也没怎么分化,就是有点聚团生长。建议传代时轻柔吹打聚团细胞至单细胞和减少传代比例。
bamboopiggy
看细胞的状态不好,你要不传几代再做,这个细胞一般在融合率90%的时候,传代。
汤姆卜丽波
这个细胞传代一般用细胞刮或者吹打下来,RAW 264.7脱落后倾向于抱团,抱团时细胞是活着的,但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞,不然细胞很难重新贴壁,把细胞离心收集,用新鲜的培养基重悬细胞放到新的细胞培养瓶里之后,可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。这种情况下,把细胞离心收集,用1 mL培养基重悬,慢慢地,轻轻地吹打,直到细胞被吹成单细胞,就可以重新铺板了。
天一湖医者
不贴壁的可能原因:
●胰蛋白酶消化过度
●支原体污染
●培养基pH值过碱(NaHCO3分解)
●细胞老化
●接种细胞起始浓度太低或太高
解决方法:
●缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度
●分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物。
●使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2
●启用新的保种细胞
●调节最佳接种细胞浓度