小提质粒的产物始终很低，可能是什么原因？
相关实验：含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验
赶考的举子
- 试剂盒用的一直是天根的快速小提试剂盒
- 按说明书的要求每次准备的菌液体积还要多一些
- 每次裂解细菌的时间按说明书来
- 排除了低拷贝质粒的因素
- 结果大多都只在100ng/ul左右
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3 个回答
Keven轩
有帮助
可以试试热洗脱冷结合，最后一步离心除去乙醇之后在60度金属浴上烘干5min让乙醇充分挥发，同时减少洗脱液的量
天一湖医者
有帮助
手法是最重要的，溶液1.2.3都要温柔些，能多温柔就多温柔，另外时间的掌握也很关键。
未来9
有帮助
可能是手法不对，或者方法不当。
提质粒过程中，动作一定要轻柔，混匀一般颠倒三五次就可以，不然会把质粒弄断，然后除蛋白的时候多离心几次，最后如果还不行可能质粒拷贝数低，可以加药刺激，或者换试剂盒
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