BelleK1EH
在保存或抽提DNA过程中,需要哪种缓冲液? 如果需要,哪种缓冲液比较好?
Keven轩
一般是用1X PBS磷酸盐缓冲液
bamboopiggy
一般用TE buffe人, PH 8.0 的Tris 10mM, PH 8.0 的EDTA 1mM,加mQ水,配制。
天一湖医者
考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用。磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围,可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉 淀;在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCL(pKa=8.0)的缓冲 系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCL系统,而TE缓冲液中的 EDTA更能稳定DNA的活性.
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