鸡骨骼肌原代卫星细胞提取及培养

楼主你好，请问第一题解决了吗？利用雏鸡提取原代细胞是否可行呢？

第2个问题，细胞污染严重原因和处理细胞污染原因和处理，养成良好的无菌操作的习惯，拿70%的酒精擦手，擦超净台擦培养瓶擦培养基瓶，各种瓶子的口多拿火焰灼伤，就不再会发生细菌污染。决定要进行细胞培养，首先一定要有强烈的无菌意识，操作中要求自己遵守严格的操作规程，不要怕麻烦，越细心越好，越啰嗦越好。在提取超组织时，往往头盔距离组织很近，所以要戴口罩很重要，还要换无菌衣另外每次开始实验前，先用紫外照无菌台和实验室20分，用酒精擦手台面不消毒的器械，实验中如允许尽量多过或开启或盖盖都靠近火焰或在无菌台深处进行使用，无剪裁后再用酒精擦全面台面，此外招20分钟还要做到绝对无菌，那不可能，但我们可以做到最大限度的减少含菌量。使用完的东西尽快移出无菌台，另外无菌台上的器械试剂摆放也一定要遵循一定的顺序。

第五题，1、培养物一经接种到培养器皿(瓶) 中就不在分割，任其生长繁殖;2、原代培养中的"代”并非细胞的“代”数，因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生多代子细胞;3、原代培养过程中不分割培养物不等于不更换培养液,也不等于不更换培养器皿。正常细胞培养的世代数有限， 只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。

第二个问题:

1做好人员的消毒工作，2操作时一定要保持无菌操作的原则，比如说使用移液枪时，将容器倾斜以便于移液，切勿将枪杆碰触瓶口及内壁。一旦发生倒吸情况，要及时用酒精棉球擦拭，以免液体残留导致细菌滋生，比如说操作时，试剂不用尽量及时盖上盖子，每开一个试剂要用酒精灯消毒。3可以加入相应的抗生素。

第三个问题:

这个是要看你的个人经验，你多做几次就知道什么叫适度适量。这个没有一个可丁可卯的一个量化