细胞传两代后开始逐渐死亡的原因？

传代不能过于频繁。建议等细胞长90%以上再进行传代，否则频繁消化细胞可能会损伤，可适当降低胰酶浓度，比如用灭菌PBS将胰酶稀释一半后使用。还有一种可能就是由于冻存细胞方式不对，复苏细胞质量比较差，不能很好的贴壁，可重新复苏一管好的细胞再试试！

别着急，你先看看，是你的培养基不合适。或者细胞污染了？

要么是你胰酶消化过了，要么就是液体配错了，当然也可能是细胞污染了

很可能是培养体系不适合;或者消化过度；或者传代比例不合适。