原核蛋白纯化，上清跑胶有带，纯化后没带是什么原因

检测结合后的上清，以及beads，看是没结合上还是没洗脱下来。

Makr带正常说明是电泳没有问题，目的蛋白和杂蛋白都没有，说明纯化过程失败了。如果是需要优化的话，应该有些杂蛋白。如果在层析介质中什么都没有洗脱下来，那就是结合上去，没有洗脱下来。就需要仔细多次清洗层析柱或更换层析介质，避免造成其他项目实验污染。

先用检测胶点了看一下，如果检测胶可以看到条带，回收胶看不到的话，可能是你PCR的产物的量太少了，回收胶胶孔宽，PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的，明亮的，但是跑回了没有条带，那是不是你的胶里有没有加EB，或者泡EB，也有可能是你做的琼脂糖凝胶没有做好。

纯化后没带，大概率是没有结合上去

洗脱样品什么都没有，应该就是样品没有结合His柱的问题。