DMSO对冻存细胞复苏的影响？

除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养方瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

我觉得应该是看不同细胞，我做前脂肪细胞3t3，一般复苏就直接培养基和冻存液混合均匀，有时4-6小时换液极少，基本就放进培养箱不管了，状态很不错，分化也很ok。但是同实验室其他人就再精细都不行，就算一开始离心冻存液去除DMSO都不行，细胞状态不好。

需要立即去除DMSO，低温时DMSO对细胞有保护作用，常温下DMSO对细胞就有毒性了

DMSO是一种细胞保护剂，它的作用机理是在细胞膜上打洞，使细胞内的水分子能渗透出来，从而防治冷冻细胞时，细胞内冰晶的形成，而破坏细胞。所以在做细胞冻存时它是必不可少的，但DMSO又能损伤细胞使用它时需要有一定浓度。

细胞给药时化合物的溶剂 DMSO在细胞给药溶解化合物时应严格控制DMSO的使用剂量：不同细胞可能对DMSO含量的敏感程度不一样，但是现在比较能接受的是采用DMSO配制化合物进行细胞给药时，DMSO的终浓度控制在0.1%以内是被认为对细胞实验没有干扰的，即1ml培养基中，DMSO体积不能超过1μl。如果发现体积超过这个比例，我们可以通过提高药物浓度， 或者采用水相多步稀释法来降低DMSO的使用量。

见过一种说法是dmso溶解的时候会放热，所以需要先加进去一些培基

我们实验室的话就是直接37°水浴复苏。然后立刻离心，丢弃上清液，重悬，加入培基培养。

DMSO在常温下有毒性，低温下毒性很小，在适宜浓度下不会对细胞产生毒性，但复苏后恢复至室温，建议尽快去除DMSO

DMSO是防冻液，对细胞有毒性，所以复苏的细胞要尽快除去dmso，尤其是敏感细胞

DMSO是一种细胞保护剂，能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤。

如果是特别标明是dmso敏感的细胞，那就需要立即去除。

大部分细胞株在解冻之后，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，这样做可以避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。

除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。

DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中，降低冰点、延缓冻存过程，同时提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，从而减少细胞损伤。深低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。