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细胞抱团该如何处理?

相关实验:细胞传代实验

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4 个回答

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Eason老歌迷

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如果是贴壁很牢固的细胞,可以多批多次进行消化,这样可以很大程度降低胰酶对细胞的损伤,避免细胞抱团。

不要整太高的细胞密度,细胞生长密度过高也比较容易形成细胞成簇,百分之七十到八十的密度就好,这样可以降低细胞抱团的几率。

如果是肉眼可见,可先让细胞静置30秒左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,也没啥好办法,重新培养吧

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bamboopiggy

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充分胰酶消化。然后尽量吹散细胞,铺板的时候,先均匀细胞直接往孔板中加

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天一湖医者

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细胞成团并不一定都会影响细胞培养进程。如果细胞轮廓清晰胞体通透,呈串状均匀聚集,证明细胞的生长状态良好。但多数情况下,聚团的细胞都是轮廓模糊、透光性差,甚至会出现合胞体,伴有细胞碎片,这证明细胞已经衰老或产生病变,状态不佳。解决细胞成团问题可以通过以下几种方式:

1、如果细胞抱团不影响生长就没问题,只是计数时较麻烦。在消化时,可在细胞由多角形变成圆型之前,用手轻磕细胞培养瓶的侧壁,使细胞从壁上脱落(最好不要吹打,对细胞形状和生长都不好)。
2、如果感觉有死细胞的 DNA,在细胞悬液中加入几滴无菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)将 DNA 链打断。轻柔地吹打细胞,防止对细胞膜造成物理损伤。
3、如果细胞抱团是肉眼可见的,可让细胞静置半分钟左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,目前还没有特别好的分离方法,只能等细胞状态改善后将这部分细胞慢慢排除出去。
细胞培养瓶内的细胞出现抱团现象,可以按照以上方法进行处理,在细胞培养过程中需要及时观察细胞的生长状态,并针对所出现的情况做出相应的调整。
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未来9

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可以在复苏新细胞的同时,进行聚团细胞“拯救”。首先,将带有聚团细胞的样品低密度连续传代,约三代过后,可逐渐分散为独立个体,再通过监测细胞活力状态,判断是否可用来进行下游实验。若肉眼可见,即可直接通过清洗和吸出,或是在消化后将悬起的细胞样品静置数十秒以沉淀团块。对于死细胞聚团,可以在细胞液中适量加入DNase以断裂DNA。

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