Eason老歌迷
如果是贴壁很牢固的细胞,可以多批多次进行消化,这样可以很大程度降低胰酶对细胞的损伤,避免细胞抱团。
不要整太高的细胞密度,细胞生长密度过高也比较容易形成细胞成簇,百分之七十到八十的密度就好,这样可以降低细胞抱团的几率。
如果是肉眼可见,可先让细胞静置30秒左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,也没啥好办法,重新培养吧
bamboopiggy
充分胰酶消化。然后尽量吹散细胞,铺板的时候,先均匀细胞直接往孔板中加
天一湖医者
细胞成团并不一定都会影响细胞培养进程。如果细胞轮廓清晰胞体通透,呈串状均匀聚集,证明细胞的生长状态良好。但多数情况下,聚团的细胞都是轮廓模糊、透光性差,甚至会出现合胞体,伴有细胞碎片,这证明细胞已经衰老或产生病变,状态不佳。解决细胞成团问题可以通过以下几种方式:
未来9
可以在复苏新细胞的同时,进行聚团细胞“拯救”。首先,将带有聚团细胞的样品低密度连续传代,约三代过后,可逐渐分散为独立个体,再通过监测细胞活力状态,判断是否可用来进行下游实验。若肉眼可见,即可直接通过清洗和吸出,或是在消化后将悬起的细胞样品静置数十秒以沉淀团块。对于死细胞聚团,可以在细胞液中适量加入DNase以断裂DNA。