丁冉1234
有可能是曝光液时间久了失效或是条带上沾了太多的曝光液
dxy_nkqusvl2
二抗孵育时间过长,或者是未能完全封闭,建议重配封闭液,充分溶解
半糖奇朵
是所有的条带都是这样吗?如果是都是这样,要考虑转膜,封闭的问题;如果只是一个目的分子的条带这样,那就局限在这个目的分子这里,看看抗体稀释比例或者稀释液这些
洛噜啦噜啦嘞
一般是显色液不足导致的,建议考虑一下
未来9
有可能是显色液的问题,你可以重新配好显色液,然后滴加到PVDF膜上,正反都加一遍,注意避光操作
天一湖医者
封闭没有做好,抗体有比较严重的非特异性吸附。解决:用5%的无糖低脂的奶粉做封闭,效果比BSA的还好还便宜。时间要摸索下。
环境光源污染。解决:一个好的暗室。
试剂问题。配置新鲜的试剂。
Eason老歌迷
时间太长了?时间越长荧光越弱。或者看看封闭问题
bamboopiggy
抗体是反复用的吗?可能是抗体坏了。如果是新抗体,可能需要摸条件