细胞培养过程中，总是不容易贴壁，怎么弄呢

具体培养的是什么细胞呢？

先查一下相关文献，对此类细胞的培养条件、保存条件，然后确认一下细胞来源是否可靠，保存条件是否符合等。如果还找不到问题，那就看看培养基的各个成分有无失效或者过期的，培养箱的温湿度是否在控。

细胞消化是否过度？

细胞培养所用平皿是否有处理，以帮助细胞贴壁？

细胞状态是否良好？可以重新复苏试试

细胞在传代之后要静置，不要过几个小时就拿出来看看

可以试试用促贴壁试剂处理一下孔板

可能是细胞的问题，可以用新的保种细胞 ，改变接种细胞浓度

一、培养细胞不贴壁

可能原因：

1.胰蛋白酶消化过度 ；

2.支原体污染 ；

3.培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；

4.细胞老化 ；

5.接种细胞起始浓度太低或太高 。

解决方法：

1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度；

2.分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物；

3.使用无菌酸溶液调整pH值或充入无菌CO2 ；

4.启用新的保种细胞 ；

5.调节最佳接种细胞浓度。

1、胰蛋白酶消化过度：胰蛋白酶是帮助细胞进行消化的，如果消化过度会对细胞的活性将产生较大的损伤，并有细胞漂浮。可以通过缩短消化时间或降低胰蛋白酶浓度的办法进行控制。2、支原体污染：细胞对环境比较敏感，如果操作人员不注意卫生、或工作环境及实验器材出现污染都会导致细胞间的交叉污染，出现不贴壁现象。如果发现支原体污染，及时丢弃培养物。

3、细胞老化：细胞老化（cellular aging）是细胞随生物体年龄增长而发生退行性变化的综合，如果传代前细胞已汇合就会导致其失去黏附性。可以复苏新的保种细胞，重新进行培养。此外，如果接种细胞时得起始浓度太低或太高也会影响细胞的贴壁性能，调节好合适的接种细胞浓度可以解决这一问题。