悬浮性细胞应如何传代处理?

如果细胞密度够，可以直接吸出一部分加培养基，如果细胞密度不够，可以离心后取沉淀加入培养基

悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮生长细胞的传代培养要比贴壁细胞简单得多，通常有两种方法。

1．直接给带传代的培养瓶中补充一定量的新鲜培养基，然后将进行分装。

2．先通过离心弃掉营养匮乏的旧培养基，然后再用适量的新鲜培养基重悬细胞沉淀，最后将其分装至培养瓶中即可。

悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。

悬浮细胞的传代方法有2种

1、直接传代法：

①待悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄），即可传代；

②用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③加入适量的新鲜培养基，继续培养。

2、离心传代法：

①将细胞悬液转移到离心管内；

②150g离心5min，弃上清；

③使用新鲜的培养基重悬细胞；

④吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000 rpm/min 室温离心5 min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8)，每T25瓶加完全培养液至4-5 ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。

一般实验室中常用直接传代法和离心传代法(在发现有细胞碎片的情况下)来处理悬浮细胞