大草原的小灰驴
我们实验室羊水细胞接种后需要10天以上才能贴壁,因此想请教大家可能是什么原因,先谢谢大家!
耗材:注射器:瑞捷(国产)无菌15mL离心管(Corning) ,培养瓶(Corning)
实验过程如下:
羊水抽出后,直接在手术间从15mL注射器中打到离心管中(手术间温度25摄氏度左右),每次可能抽2至5个,抽完一起拿到实验室进行接种。
15000rpm离心15min,然后将上清液吸出弃掉,之后向离心管中加入张氏培养基吹打混匀后转移到培养瓶中。全过程为无菌操作。
有可能是什么原因导致的呢?例如培养箱温度和气体浓度的校准、耗材的质量、容器毒性物质暴露、光照时间太长导致内容物分解对细胞造成影响,接种时的污染等问题?
谢谢大家啦!
府宅
dxy_gwrp7ndq
羊水中的F 细胞在再培养中潜在的生长期最长,所以至少需要10天才能贴壁
bamboopiggy
你们离心速度太高了,1万5,15min细胞都被离心坏了,改为3000rpm,15min试试