丁香实验_LOGO
登录
提问
提问
我要登录
|免费注册
丁香通

曝光问题求助,背景很黑条带几乎看不到,是怎么回事呢

相关实验:Western印迹技术检测蛋白质实验

user-title

只想顺利读博

我的一抗稀释比例为1:1000,二抗稀释比例为1:1000,封闭时间2小时,洗膜10分钟一次,洗4次。

wx-share
分享

5 个回答

user-title

喵喵喵柏

有帮助

请贴一个图片

背景黑可以用软件调整,需要区分是多克隆抗体,还是封闭不好,还是没有调整好呢?

user-title

dxy_gwrp7ndq

有帮助

1.二抗浓度可能高了,并且洗膜时间不够,最后洗6次,每次5min

2、膜被曝光了

user-title

府宅

有帮助

原因:

封闭没有做好,抗体有比较严重的非特异性吸附。解决:用5%的无糖低脂的奶粉做封闭,效果比BSA的还好还便宜。时间要摸索下。

环境光源污染。解决:一个好的暗室。

试剂问题。配置新鲜的试剂。

user-title

vae1476

有帮助

你的内参也是这样吗?如果不是考虑抗体问题,如果也是,封闭牛奶和BSA都试试

user-title

bamboopiggy

有帮助

你二抗用1:4000试试,可能是是二抗太浓了。但也可能是你一抗不特异。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序