DNA提取的要求是什么？总是实验失败，大家告诉一下

主要是无菌操作，尽量选用进口的试剂盒

从大肠杆菌里提取dna？你是怎么失败呢？浓度低？可以直接买个质粒小提的kit来提。当然你菌量要够。od值要有0.6-0.8

尽量使用新鲜的组织材料，采集样品如果不马上用于提取实验，请置于-20或者-70以下存放，期间应避免反复冻融。使用反复冻融或长时间未低温冷藏的样品进行DNA提取时，所提取的DNA片段可能不完整，或收获量低。对于较难破碎细胞壁的细菌和酵母细胞，应尽量收集处于生长对数期的菌体，以取得最佳实验效果。

样品材料进行破碎(及匀浆)可以提高裂解效率，组织破碎后可以充分与裂解液接触，利于裂解。不同来源的组织材料，根据组织成分的差异，样品处理的方式也有所不同。一般来说，样品的破碎方式，主要有液氮研磨、匀浆和蛋白酶K消化。

在低盐的条件下，DNA可以很容易地从硅胶膜上洗脱下来，洗脱液采用低盐缓冲液(10mmol/I, Tris. HCI，pH8.5)。 洗脱液pH值在7.0~8.5之间时，洗脱效率最大，如果用ddH2O进行洗脱，请保证pH值在此范围内。将洗脱缓冲液65预热，进行洗脱，将会提高洗脱效率。DNA分子在碱性条件下可以稳定存在，试剂盒所用洗脱液为pH8.5的缓冲液，可以稳定保存DNA分子。

实验室所用ddH2O的pH值往往小于7.0，长时间保存，DNA容易发生降解。长期保存时，应置于-20或-80，并且避免反复冻融。

DNA提取的要求：

保证结构的完整性；

尽量排除其他大分子成分的污染（蛋白质、多糖及RNA等）；

保证提取样品中不含对酶有抑制作用的有机溶剂及高浓度的金属离子。