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磁珠分选和流式分选的问题

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丁香实验

请问磁珠分选和流式分选的问题:我想对BMSCs进行分选,先就请教了实验室一些前辈,他们说流式分选对细胞活力影响很大,因此建议用磁珠分选。但是很多文献报道的磁珠分选和流式分选后细胞的活力是没有差别的,不知数据是否合理?磁珠分选所使用的磁珠相对比较贵,我需要做很多次分选,经费不知是否合适做磁珠分选。而流式分选不需要自己重新购置仪器,流式分选所用的抗体也比磁珠便宜,请问高手,我用流式分选是否合适?

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9 个回答

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dxy_29k93ve4

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磁珠分选一般是细胞数比较多,如果流式分选时间会很长,磁珠分选可以较短时间拿到比较多的细胞;流式分选会时间相对较长,同时分选过程会给液滴加电,以及如果液体打到收集管侧壁都会对细胞造成损伤,但是可以同时多标进行分选,磁珠分选就做不到
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莹啊免疫啊

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流式分选除了对细胞伤害比较大以外,也很难保持完全无菌,从染色到离心好多次,从机器分选出来的时候就难免要开盖拿出来,如果后续还想养很久的可能要考虑这个问题。如果直接分选完就提蛋白提RNA了就无所谓。还是流式比较好。 磁珠比较贵,而且筛选好几个的时候对细胞伤害也不小。不过可以无菌,阴性选择的话伤害能小点吧。
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CXCR3

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流式分选对细胞是否有影响要取决于细胞处理的过程以及分选的时长。如果分选的细胞占比很低又需要分的比较多,尽量选择磁珠分选。流式分选的时候,可以在收集管里多加一些FBS 分选时不要让液流打在管壁上。
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西柚味的芋圆

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如果是小课题组,组内没有购买流式分选仪器的,建议用磁珠分选。我们组在中心实验室做实验,约个流式仪器真难,后面买了磁珠分选,自由安排时间,细胞状态和进度好好多。
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txs900416

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流式分选的好处是可进行多标记细胞的分析,但缺点是分选时电场的存在可能造成细胞状态的不佳;磁珠分选简便易行,无需昂贵的分选流式仪,但缺点是只能进行简单标记的细胞分选。BMSC粘附作用比较强,不适合磁珠分选,容易粘附在管道中,此外BMSC高表达CD105、CD73、CD90,不表达 CD45, CD34, CD14,这么多标记的话,还是流式分选可行性高一些。
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颜渊溪桥

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主要看细胞量,如果需要的量很多磁珠,如果需要的细胞要染多个指标,并且群体要很精确用流式好些。
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Timy最爱柠檬水

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磁珠分选比较温和,对某些较敏感的免疫细胞比较适用,操作也比较简单便捷。 流式分选更适合比例较低的细胞群,但操作要求较高。
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peaceful13

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磁珠分选和流式分选各有优劣势~而且有时候一些稀少细胞还需要先用磁珠做预富集再做流式分选~关于分选的活力问题~主要看采取的分选方式~看起来你的细胞需要多重指标才能定义改群体~那么建议用流式分选~但上流式分选~分选的效率也和细胞数量的百分比以及细胞数相关~所以如果目的细胞在整体中的百分比比较低~建议用磁珠预富集,磁珠多重正选分选次数越多对细胞的损伤肯定越大的
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dxy_0mxazdaw

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建议用流式分选。分选过程时间尽量短,收集液可以用培养基,细胞活力会好点。磁珠分选纯度不如流式分选。
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