丁香实验
我用免疫组化方法检测细胞内survivin蛋白的表达。开始是用博士德的survivin抗体,博士德的免疫组化试剂盒(SABC)。检测的结果是在lovo人结肠癌细胞中survivin蛋白高表达。但是采用SP法来检测则得出相反的结果,DAB显色表现为survivin蛋白表达低(同样显色5分钟)。
我的操作过程:
4%多聚甲醛固定,h2o2-甲醇灭活内源性过氧化物酶,封闭,孵育一抗(survivin博士德,后来是用的santa公司的 1:500)。4度过夜;孵育相应二抗,孵育SP或SABC试剂,洗涤,DAB显色5分钟。
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