外周血免疫细胞检测

静脉全血
肝素 鼠抗人目的单克隆抗体 溶红细胞液 生理盐水
FCM 测量管

1. 取 1000 U/ml 肝素 100 ul 抗凝静脉全血，置于 FCM 测量管中。

2. 直接标记法：加入带荧光标记的鼠抗人目的单克隆抗体试剂 10 ul，充分混匀，在 4℃ 冰箱中反应 30 min。

3. 间接标记法：加入不带荧光标记的鼠抗人目的单克隆抗体试 10 ul，充分混匀，反应 30 min，再加入带荧光标记的羊抗鼠抗体，反应 30 min。

4. 再加入 2 ml 溶红细胞液，充分混匀，在 4℃ 冰箱中反应 5~10 min。

5. 以 1500 r/min 离心 5 min，去上清。

6. 用生理盐水洗 1 遍，收集细胞，上机检测。