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科研学霸天团，48小时有问必答

问细胞污染，被支原体污染

是TTT

可以高压灭菌加热培箱此方法更加方便:75%酒精擦拭培箱里面，将板子拆卸放入细胞操作台紫外灭菌半小时再重新装入细胞培基里面添加支原体抗生素预防支原体污染

9 回答165 围观

问做细胞增殖实验，可以用丙酮作为药物溶剂吗？ dmso溶解度太小，无法保证0.1%。

loveliufudan

丙酮可以用作药物溶剂，但需要注意以下几点：细胞对丙酮的敏感性较大，丙酮浓度过高会对细胞产生毒性作用，因此需要控制丙酮的浓度，一般建议不要超过0.5%。丙酮溶解药物的能力较差，需要根据药物的性质选择合适的溶剂。如果 DMSO 溶解度太小，可以考虑使用其他的溶剂，如甲醇、乙醇等。在实验过程中，应该设置合适的对照组，以评估丙酮对实验结果的影响。同时，还应该对丙酮进行空白对照实验，以确定是否会对实验结果产

5 回答99 围观

问细胞铁死亡在光镜下能看到变化吗

dxy_mqg1dtg8

可以在投射电子显微镜下看线粒体的变化，发生铁死亡的细胞线粒体会变小，

6 回答110 围观

问thp1建立稳转细胞系，是在悬浮状态下感染还是在PMA诱导贴壁后感染病毒再筛选？

是TTT

PMA诱导贴壁后再感染筛选，筛选完成以后再去除PMA

5 回答109 围观

问HepG2细胞从边缘脱落，有什么可能的原因

是TTT

可能存在支原体污染，支原体污染是细胞培养过程中常见的污染。有两种方法可以检测:1.细胞培基里面添加一定量的支原体去除剂，观察细胞状态是否有所改善。2.有支原体检测试剂盒可以检测。

5 回答91 围观

问THP1细胞用PMA诱导分化成巨噬细胞后，还能继续增殖吗？

是TTT

理论上THP1细胞用PMA诱导分化成巨噬细胞后，增殖只是受到抑制，但是实际上基本不会再增殖。诱导前接种细胞细胞密度以1-2×10⒌为宜

8 回答125 围观

问#荧光光谱图求助|含苯环多肽|500nm处荧光峰

loveliufudan

在荧光光谱中，300 nm左右的峰通常来自于芳香族氨基酸（如苯丙氨酸和色氨酸）的π-π跃迁，这与多肽的存在方式无关，因为它们本身就具有这种吸收行为。而500 nm附近的峰通常是由于多肽中存在色团（如酪氨酸、儿茶酚氨基酸等）的荧光引起的。这些色团的荧光峰通常比芳香族氨基酸的荧光峰更红移，因此它们在500 nm左右出现是很常见的现象。另外，缓冲液的添加可能会对荧光光谱产生影响，因此，相同样品在不同的

2 回答92 围观

问细胞冻在负80冰箱忘记了，半年后拿出来复苏会影响细胞的功能吗。

loveliufudan

长时间存放在负80℃的条件下可以帮助保护细胞，并确保其在复苏时保持较好的功能。一般情况下，细胞在负80℃的环境下保存长达数年也是可能的。因此，如果您将细胞存放在负80℃的冰箱中半年，通常情况下不会对其功能产生太大影响。然而，细胞存储在负80℃的环境下也需要一些特定的保存和恢复方法。在进行复苏之前，应该使用适当的冻存液体对细胞进行保护，并在复苏前将其缓慢回温。此外，细胞在冻存和解冻过程中也容易受到损

4 回答171 围观

问4t1细胞，传代后这种污染培养箱怎么处理？

小小小小小芳

我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁，然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上，然后通风一整天（同时打开紫外线照射）。

5 回答89 围观

问HCT116细胞培养问题

小小小小小芳

可能原因1.由于更换不同培养液或血清；2.培养液中一些细胞生长必须成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏；3.培养物中有少量细菌或真菌污染；4.试剂保存不当；5.接种细胞起始浓度太低；6.细胞已老化；7.支原体污染。

3 回答100 围观

问请问诱导成功的贴壁脂肪细胞，取出一部分使用后，剩余的细胞怎么保存啊？重新种回去细胞也不会再贴壁了，冻存可以吗？冻存条件呢？

来一起探讨

可以将近剩余细胞进行接着培养，也可以进行冻存，冻存时，注意DMSO与血清的比例，1/9，或是DMSO，血清，培养基比例为1/2/7，-80℃可短期冻存，若要进行长期冻存可保存在液氮罐中。

6 回答85 围观

问做的3T3诱导分化第五天油红O染色,是图片这样的感觉脂滴颜色不是那么深，请教一下应该怎么改进

是TTT

稍微延长一点染色时间，缩短脱色时间染色会深一些

4 回答68 围观

问CHO细胞培养过程中发现细胞变大的原因是什么？

loveliufudan

CHO细胞是一种快速增殖的细胞系，在培养基中得到足够的营养和适宜的环境条件时，它们会开始不断地分裂，从而导致细胞数量增加，细胞直径也会随之增加。因此，如果CHO细胞在培养一段时间后直径达到20+，那么细胞增殖很可能是导致细胞直径增加的主要原因之一。

2 回答97 围观

问U87形态怎么会有这个

毛利小五郎的徒弟

可能是杂质污染，少量不影响的。

1 回答49 围观

问我是用trizol提rna的，刚开始自己上手，加了氯仿静置后离心，结果清液在下层，这是怎么回事。

loveliufudan

通常是因为：1.不够混匀：在加入氯仿后，如果您没有充分混合Trizol和氯仿，氯仿和Trizol相互作用的速度会变慢，导致乙醇-RNA混合物不够纯净，最终可能会导致清液沉淀在下层。2.沉淀时间太短：在加入氯仿后，如果您没有充分静置，氯仿和Trizol的分离可能不充分，也可能导致清液在下层。3.离心时间不足：如果您没有充分离心，氯仿和Trizol可能没有完全分离，这也可能导致清液在下层。因此，为了避

2 回答106 围观

问脐带细胞不贴壁，分裂爬出来的少，有哪些原因？

GATARX

也许是细胞培养基不能够支持细胞生长，可以多加点血清试试！

4 回答69 围观

问做细胞荧光实验时，底物荧光素是如何进入小鼠体内的?最低需要多少剂量?

asswei

荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的，约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的浓度是150mg/kg 。20克的小鼠需要3毫克的荧光素。常用方法是腹腔注射，这种方法扩散较慢、开始发光慢、持续发光长。若进行荧光素静脉注射，这种方法扩散快、开始发光快，但发光持续时间很短。

3 回答55 围观

问细胞培养基问题求助？

asswei

MEM培养基（Minimum Essential Medium）是动物细胞培养中的常用的培养基，主要是贴壁细胞的培养。修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙（Ca）MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（高于4

4 回答73 围观

问悬浮细胞培养问题求助？

loveliufudan

如果您的悬浮细胞不能聚集成球，可能是由于以下原因之一或几个原因的综合影响：细胞数量太少：如果您使用的细胞数量太少，可能会导致细胞不够密集，无法形成球状团块。您可以尝试增加细胞密度，增加细胞的相互接触，促进聚集。细胞质量不好：如果您使用的细胞质量不好，可能会影响细胞的黏附和聚集能力，导致细胞不够聚集成球。可以尝试更换新的细胞株或重新制备培养基。培养环境不佳：培养环境对细胞的生长和聚集能力也有很大影响

2 回答113 围观

问Hela细胞迁移能力

loveliufudan

如果野生型Hela细胞在72小时内没有显示出任何迁移迹象，可能是由于以下原因之一或几个原因的综合影响：细胞密度太低：如果您使用的细胞密度太低，可能会导致细胞无法形成足够的细胞群，也会影响细胞间的相互作用和迁移能力。建议尝试增加细胞密度。细胞状态不佳：如果您的细胞状态不佳，例如细胞老化、细胞质量下降等，也可能影响细胞的迁移能力。建议检查细胞状态并进行必要的处理，例如更换新的细胞株、重新制备培养基等。

3 回答84 围观

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