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科研学霸天团,48小时有问必答
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做平板克隆形成使用,最后要计算克隆数和细胞数的比值,怎么确保铺板细胞数一致或者确认铺板的细胞数呢?用细胞自动计数仪误差也很大啊!
bamboopiggy
一般要做三个复孔,用细胞计数仪时,原始细胞的浓度,最好控制在一个数量级。
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问
原代Muller
毛利小五郎的徒弟
贴壁了,你的做法是对的,该换不换容易影响细胞。
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求助:曼月乐环控释孕激素的原理
天一湖医者
曼月乐环其主要作用机理是在宫腔内发挥局部孕激素的作用,具有很强的拮抗子宫内膜增生的作用。同时,由于孕激素的作用,宫颈黏液变稠,阻止精子通过宫颈管,改变了子宫和输卵管的部分。内环境抑制精子的活动和功能以阻止受精,部分女性仍受抑制排卵。通过以上机制,起到治疗特发性月经过多的作用,起到避孕的作用。
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问
电生理,求助
bamboopiggy
sEPSC 指突触前膜释放兴奋性神经递质,与突触后膜上的受体结合,引起突触后膜内向的电流。这个值得半衰减时间,代表兴奋传递的时间
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问
求助|在人视网膜神经胶质瘤细胞(WERI-RB-1)培养过程中细胞状态不明,向各位大佬请教
毛利小五郎的徒弟
有可能是细胞破裂后的胞内物,需要去除再培养活细胞。
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问
求助🆘pcr结果分析
bamboopiggy
唉,这个不关统计软件的问题,你要考虑到error bar的问题。
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问
H9c2 ROS荧光问题求助
bamboopiggy
你是给你的细胞什么处理了么?H9C2 是大鼠的心肌细胞,样子如上。呈粗大的梭形。
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问
求助:药物比如褪黑素和肿瘤细胞的共培养,浓度梯度一般怎么分组为好?
青云羡鸟飞KN22
预实验先从10倍稀释开始,进行相应的验证之后选择良好继续细分
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问
求乳腺癌紫杉醇耐药株怎么做啊? 每次加完药几天后就不行了
念冬寒
每次加药72小时后撤药,待单克隆长起来后,给药浓度加倍,重复步骤(我是这样成功的,不过是别的癌种)
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问
动物实验组织学层面如何检测细胞凋亡,最好的方法是什么?
balalaLy
切片可以使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡
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问
细胞长得咋样可以传代/铺板/药物处理/收样等时机。有养细胞图片最好。
申东熙老伯
看细胞的融合度以及生长速度,细胞状态好融合度80-90%就可以传代。铺板的话要根据接下来做的实验来定,最好细胞计数之后再铺板。
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问
请问这是什么污染?细胞越多白点越多,培养基没变混浊
毛利小五郎的徒弟
细胞看着像分化,白点可能是蛋白析出
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问
不是消化酶消化下来之后需要用不含血清的培养基终止消化吗?
ZIWENHUA
消化酶只是媒介,不用绕弯路,直接离心即可
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问
如何从血液中提取出T原代细胞?
毛利小五郎的徒弟
先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物,然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离;或者利用流式细胞仪进行分选。
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问
肝细胞CPT1A,CPT2,ACO,ACC1和FAS分别的作用
loveliufudan
这些都是肝脏组织中脂质摄取转运相关分子,跟脂代谢密切相关。
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问
RNA-FISH
毛利小五郎的徒弟
一般长链可剪切位点比较多,短链灵敏度高
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问
求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验
麻黄连翘赤小豆
M1促炎M2抗炎,LPS和正常组肯定有区别表达,在此基础上,检测白介素6,12;4,10,13,炎症相关信号的激活也能说明一些问题
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问
PMA诱导THP-1贴壁却不分化?
毛利小五郎的徒弟
做实验时也是尽量要避光,你降低细胞密度会分化
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问
血管内皮通透性
loveliufudan
楼上说的很好,这里补充一个监测方法:还可以用电阻抗仪监测跨内皮细胞电阻(TER)来测量通透性。
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问
免疫荧光,BSA封闭液用水配行不
Dr_劉医生
直接用水配就行了,按体积比就行,相当于稀释,看你干什么用,如果还要做PCR的话,建议最好用去离子水或者超纯水
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