实验问答16,983,696 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问做平板克隆形成使用，最后要计算克隆数和细胞数的比值，怎么确保铺板细胞数一致或者确认铺板的细胞数呢？用细胞自动计数仪误差也很大啊！

bamboopiggy

一般要做三个复孔，用细胞计数仪时，原始细胞的浓度，最好控制在一个数量级。

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问原代Muller

毛利小五郎的徒弟

贴壁了，你的做法是对的，该换不换容易影响细胞。

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问求助：曼月乐环控释孕激素的原理

天一湖医者

曼月乐环其主要作用机理是在宫腔内发挥局部孕激素的作用，具有很强的拮抗子宫内膜增生的作用。同时，由于孕激素的作用，宫颈黏液变稠，阻止精子通过宫颈管，改变了子宫和输卵管的部分。内环境抑制精子的活动和功能以阻止受精，部分女性仍受抑制排卵。通过以上机制，起到治疗特发性月经过多的作用，起到避孕的作用。

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问电生理，求助

bamboopiggy

sEPSC 指突触前膜释放兴奋性神经递质，与突触后膜上的受体结合，引起突触后膜内向的电流。这个值得半衰减时间，代表兴奋传递的时间

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问求助|在人视网膜神经胶质瘤细胞（WERI-RB-1）培养过程中细胞状态不明，向各位大佬请教

毛利小五郎的徒弟

有可能是细胞破裂后的胞内物，需要去除再培养活细胞。

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问求助🆘pcr结果分析

bamboopiggy

唉，这个不关统计软件的问题，你要考虑到error bar的问题。

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问H9c2 ROS荧光问题求助

bamboopiggy

你是给你的细胞什么处理了么？H9C2 是大鼠的心肌细胞，样子如上。呈粗大的梭形。

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问求助：药物比如褪黑素和肿瘤细胞的共培养，浓度梯度一般怎么分组为好？

青云羡鸟飞KN22

预实验先从10倍稀释开始，进行相应的验证之后选择良好继续细分

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问求乳腺癌紫杉醇耐药株怎么做啊？每次加完药几天后就不行了

念冬寒

每次加药72小时后撤药，待单克隆长起来后，给药浓度加倍，重复步骤（我是这样成功的，不过是别的癌种）

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问动物实验组织学层面如何检测细胞凋亡，最好的方法是什么?

balalaLy

切片可以使用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）检测凋亡

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问细胞长得咋样可以传代/铺板/药物处理/收样等时机。有养细胞图片最好。

申东熙老伯

看细胞的融合度以及生长速度，细胞状态好融合度80-90%就可以传代。铺板的话要根据接下来做的实验来定，最好细胞计数之后再铺板。

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问请问这是什么污染？细胞越多白点越多，培养基没变混浊

毛利小五郎的徒弟

细胞看着像分化，白点可能是蛋白析出

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问不是消化酶消化下来之后需要用不含血清的培养基终止消化吗？

ZIWENHUA

消化酶只是媒介，不用绕弯路，直接离心即可

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问如何从血液中提取出T原代细胞？

毛利小五郎的徒弟

先从PBMC中分离得到淋巴细胞的混合物，然后用CD4+T细胞的单抗,免疫磁珠法分离；或者利用流式细胞仪进行分选。

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问肝细胞CPT1A，CPT2，ACO，ACC1和FAS分别的作用

loveliufudan

这些都是肝脏组织中脂质摄取转运相关分子，跟脂代谢密切相关。

2 回答667 围观

问RNA-FISH

毛利小五郎的徒弟

一般长链可剪切位点比较多，短链灵敏度高

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问求助|有无大佬分享一下BV2细胞的分型免疫鉴定经验

麻黄连翘赤小豆

M1促炎M2抗炎，LPS和正常组肯定有区别表达，在此基础上，检测白介素6，12；4，10，13，炎症相关信号的激活也能说明一些问题

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问PMA诱导THP-1贴壁却不分化？

毛利小五郎的徒弟

做实验时也是尽量要避光，你降低细胞密度会分化

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问血管内皮通透性

loveliufudan

楼上说的很好，这里补充一个监测方法：还可以用电阻抗仪监测跨内皮细胞电阻（TER）来测量通透性。

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问免疫荧光，BSA封闭液用水配行不

Dr_劉医生

直接用水配就行了，按体积比就行，相当于稀释，看你干什么用，如果还要做PCR的话，建议最好用去离子水或者超纯水

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