相关实验：质粒的转化及转化子的鉴定实验
dxy_v234cfe7
2022-11-10
土井挞克树
说明质粒转入有问题，可以验证表达蛋白情况，重选质粒载体。
我的重组质粒已经构好了送去测序是对的。我先把它转入大肠进行扩增。再从大肠把重组质粒提出来。也送去测序是对的 再把提出来的重组质粒转入酵母做表达。电转后抗性平板上长了很多但菌落。但是做菌落PCR就是没有对应条带。菌落PCR用的是载体通用引物
huarenqiang5
因为很容易有隐形菌落的，最主要的就是载体自连了，而这种现象在单酶切克隆里是最常见的，需要去磷酸化，才能降低自连概率。
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问
电转导线性化质粒DNA酵母菌细胞
电转了四次，污染了三次，污染源一摸一样，都是杆状的细菌，培养基里面有双抗，而且每次都很小心了，但是每次电转都污染😭😭😭
【求助】细菌转化涂板后，板子变得模糊不清，像脏掉的玻璃一样。
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