相关实验:质粒的转化及转化子的鉴定实验
dxy_v234cfe7
2022-11-10
毛利小五郎的徒弟
说明质粒转入有问题,可以验证表达蛋白情况,重选质粒载体。
我的重组质粒已经构好了送去测序是对的。我先把它转入大肠进行扩增。再从大肠把重组质粒提出来。也送去测序是对的 再把提出来的重组质粒转入酵母做表达。电转后抗性平板上长了很多但菌落。但是做菌落PCR就是没有对应条带。菌落PCR用的是载体通用引物
huarenqiang5
因为很容易有隐形菌落的,最主要的就是载体自连了,而这种现象在单酶切克隆里是最常见的,需要去磷酸化,才能降低自连概率。
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问
电转导线性化质粒DNA酵母菌细胞
电转了四次,污染了三次,污染源一摸一样,都是杆状的细菌,培养基里面有双抗,而且每次都很小心了,但是每次电转都污染😭😭😭
【求助】细菌转化涂板后,板子变得模糊不清,像脏掉的玻璃一样。
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