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四型胶原酶粉末通常需要在特定的温度和pH条件下配制才能发挥最佳效果。配制方法可能因品牌和产品而异,所以最好遵循生产商提供的说明书。
一般来说,将四型胶原酶粉末加入到指定的温水中,搅拌均匀直至完全溶解。然后将其加入到需要的培养基或组织培养基中。
需要注意的是,四型胶原酶通常在酸性条件下活性最佳,所以配制时需要确保pH在5-7之间。
配制时还需注意酶粉末和培养基的温度差不能过大,通常在37-39℃的温度下使用。
还需注意酶粉末的保存,通常在-20℃或4℃下保存。
天一湖医者
向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20℃避光冻存。
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我是这样配的:
①. 先配制甲液和乙液
甲液(100ml):NaCL 0.8g, KCL 0.04g, NaH2PO4.2HO2 0.0078g, Na2HPO4.12H2O 0.015g, Hepes 0.238g,NaHCO3 0.035g,Glucose 0.09g
乙液(100ml):CaCL20.056g
②. 取甲液和乙液各20ml,加入Ⅳ型胶原酶100mg,再加入三蒸水调整体积至200ml,在磁力搅拌器上搅拌2小时使其充分溶解,滤器过滤分装于已高压消毒好的玻璃瓶中,于-20˚C保存备用。
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