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外泌体wb鉴定CD63和TSG101条带反白是啥原因？救救孩子
RoxanneWVAA
一抗二抗用的都是santacruz的，一抗稀释比例1:1000，二抗1:5000（反白这个问题好像一直都有点，本来二抗稀释浓度是1:2000的，看到园子里有人说可能原因是二抗浓度太高了就降到了1:5000）。
同一张膜上CD81和阴参Calnexin的条带都好好的。
有无大佬解释解释
CD63
TSG101
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4 个回答
dxy_xvgeufie
有帮助
请问解决了吗？我之前也是这样，后来我把一抗浓度降低，比如说我的抗体适合浓度为1:500-1:3000之间，我把一抗浓度直接拉到1:450左右，二抗浓度1:7000，调带就跑出来
sswei
有帮助
原因:中心部位高浓度HRP把底物消耗过快,中间部位底物消耗结束之后就不发光了。 解决办法:降低蛋白量,降低一抗和二抗的浓度。
毛利小五郎的徒弟
有帮助
1.二抗孵育时间过长，一小时即可2.目的蛋白上样量过高；
麻黄连翘赤小豆
有帮助
原因：蛋白上样量过大或HRP过多；处理对策：减少蛋白上样量，或增大二抗稀释比例，二抗可以稀释到1:10000都没问题
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