2 个回答
Dr_劉医生
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大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）流式细胞分离的具体步骤，见图
毛利小五郎的徒弟
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一、试验材料与方法
（一）材料与试剂
生后30d雄性SD大鼠, 体质量100g, SPF级; DMEM培养基; 青霉素、链霉素; 胎牛血清; 淋巴细胞分离液; 0.25%胰蛋白酶; 兔抗鼠CD34、 CD44、CD45、 CD105、 CD90荧光抗体; CO
培养箱; 倒置相差显微镜; SW-CJ 型生物仪
（二）方法
BMSCs原代分离培养: 2%戊巴比妥钠麻醉大鼠, 体积分数75%乙醇全身浸
泡消毒10 min。无菌条件取股骨及胫骨, PBS清洗3次。剪掉股骨和胫骨骨骺端, 露出骨髓腔, 用添加青、链霉素L-DMEM培养基冲出骨髓, 反复吹打; 将冲出
骨髓制成单细胞悬液。将冲洗下来液体制成单细胞悬液, 经Percoll密度梯度
离心法, 分离和搜集有核细胞, 用含15%胎牛血清DMEN-LG培养基重悬离心管
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